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玉米大斑病菌腺苷酸环化酶基因的克隆与功能分析

申珅 王晶晶 佟亚萌 李坡 郝志敏 董金皋 中国农业科学 2013年第05期

摘要:【目的】获得玉米大斑病菌(Setosphaeriaturcica)cAMP信号转导途径中腺苷酸环化酶基因(StAC),利用基因敲除技术明确其在病菌致病过程中的功能。【方法】应用简并引物PCR和GenomeWaiking技术克隆玉米大斑病菌腺苷酸环化酶基因(StAC)DNA全长序列,并对该基因进行生物信息学分析;利用Southernblotting验证基因拷贝数;通过基因敲除技术创制StAC的缺失突变体,研究玉米大斑病菌cAMP信号转导途径中StAC的功能。【结果】StAC的DNA全长为68i6bp,由5个外显子和4个内含子组成;ORF为6018bp,编码2005个氨基酸,同源序列比对发现StAC与小麦黄斑叶枯病菌(Pyrenophoratritici-repentis)的Ac基因有96%的同源性;Southernblotting证明StAC在玉米大斑病菌基因组中以单拷贝形式存在;基因功能分析表明,StAC缺失突变菌株Astac气生菌丝灰白色,不产生分生孢子,毒素活性明显减弱,致病力下降,且在渗透胁迫条件下,菌株的抗逆能力增强,色素合成发生了改变。【结论】StAC主要调控玉米大斑病菌的产孢、致病性、高渗胁迫反应、毒素活性及色素的合成代谢。

关键词:玉米大斑病菌腺苷酸环化酶致病性渗透胁迫

单位:河北农业大学生命科学学院/真菌毒素与植物分子病理学实验室 河北保定071001 河北省农林科学院植物保护研究所 河北保定071001

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