摘要：【目的】优化农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）介导转化苹果炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）的技术体系，并对转化子进行筛选鉴定，比较其生物学特性和致病性差异。【方法】以苹果炭疽病菌LXS010101分生孢子为转化受体，利用携带重组双元载体的农杆菌进行转化；对获得的转化子进行遗传稳定性测定、PCR检测及Southernblot分析；选取一定数量的转化子，比较其菌落形态、生长速率及分生孢子发育等主要生物学性状及致病性的差异。【结果】苹果炭疽病菌的最优转化体系为：病菌分生孢子悬浮液浓度1×10^5个／mL，共培养温度和时间分别为22℃和24h，共培养基中添加200μmol·mL^-1乙酰丁香酮，其转化效率达到1×10^5个孢子可获得439个转化子。随机选取30个转化子进行鉴定，发现T-DNA已整合进炭疽病菌基因组中，在所检测的转化子中都是以单拷贝的形式整合，且能够稳定遗传。与野生型菌株相比，转化子的菌落形态没有发生明显变化，但23．33％的菌株生长速率显著减低；转化子ATJ-3和ATJ-15不能产生分生孢子，在28个产孢菌株中，分生孢子萌发率显著减低的菌株占39．29％，附着胞形成比例显著减低和形态异常的菌株占25．00％。致病性测定结果显示，11个转化子的致病力显著降低，其中菌株ATJ-19完全丧失致病能力。【结论】优化的苹果炭疽病菌遗传转化技术体系，可用于炭疽病菌致病相关基因的克隆及致病分子机理的研究。

关键词：苹果炭疽病菌 遗传转化 转化子鉴定 致病性 

单位：青岛农业大学农学与植物保护学院 山东青岛266109 山东省植物病虫害综合防控重点实验室 山东青岛266109 青岛农业大学化学与药学院 山东青岛266109