摘要:【目的】通过碱性调宁蛋白(hl-calponin)基因与五指山小型猪骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal Stem cells,BMMSCs)成骨分化关系的研究,探讨成骨分化机制。【方法】添加成骨分化液对BMMSCs进行成骨分化诱导,采用茜素红染色的方法鉴定细胞成骨分化的程度;通过定量PCR分析hl-calponin基因及成骨相关基因骨桥蛋白(OSteopotin,OPN)、骨钙蛋白(osteocalCin,OCN)、核心结合因子α1(core binding factoral,Cbfα1)及核心结合因子β(core binding factorbeta,Cbfp)表达谱。【结果】①随着诱导时间的延长,茜素红染色矿化结节逐渐增多;⑦成骨标志基因0PN和OCN表达趋势一致:诱导0至14d,基因表达量呈增长趋势,诱导14d表达量最高,而后下降;成骨相关基因Cbf仅1和Cbfp表达量于第7天达到最高峰,之后逐渐下降,但仍高于诱导前;③hl-calponin基因表达量随着诱导的延续逐渐下降;诱导14—21d时,该基因基本不表达。【结论】hl-calponin基因的表达与五指山小型猪骨髓间充质干细胞体外成骨分化存在着负相关,可能是成骨分化的负调控基因。
关键词:碱性调宁蛋白 骨髓间充质干细胞 成骨分化 负调控
单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 北京100193
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