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棉花3个脂肪酸碳链延长基因的cDNA克隆和表达分析

刘丽 赵鹏 王丹 刘正杰 王玉美 华金平 中国农业科学 2013年第17期

摘要:【目的】克隆棉花脂肪酸合成碳链延长的3个重要基因,分析它们的基因表达及其对逆境胁迫的反应,为棉花高油分育种和抗逆育种提供候选基因。【方法】采用同源克隆的方法,克隆陆地棉脂肪酸合成碳链延长3个重要基因GhKAR、GhHAD和GhENR的cDNA全长;应用生物信息学方法,分析克隆基因编码蛋白的特性;通过RT-PCR,分析目标基因的组织表达特征、时空表达水平和非生物胁迫条件下的表达特性。【结果】GhI(AR和GhENR属于NADBRosemann超基因家族,GhHAB属于hotdog超基因家族;GhI(AR、GhHAD和GhENR的cDNA全长分别为1i19、906和1318bp,分别编码283、221、394个氨基酸;它们在根、茎、叶及胚珠发育不同时期均有表达。3个基因在高油材料中的基因表达水平都高于低油材料;20DPA(dayspostanthesis)到30DPA是高低油材料油分积累的主要时期,而30DPA到成熟期是高低油材料油分含量差距产生的关键时期。20DPA低油材料3个基因均有一个表达低值,高油材料基因表达量则持续升高;30DPA时表达量达到最高,其中,对于GhHAD和GhENR的表达量,棉花高油材料为低油材料2倍以上。不同非生物胁迫的诱导表达分析表明,GhKAR、GhHAD和GhENR都不同程度地受低温诱导,GhKAR和GhHAD在ABA诱导时上调表达,但都不受MeJA诱导表达;而GhENR在MeJA诱导2h时上调表达,之后逐渐下调,受ABA诱导不明显。【结论】获得了GhKAR、砌删从GhENR3个基因cDNA全长,通过基因表达特征分析,3个基因的表达可能对种子油分积累起着重要作用,同时在棉花抗逆方面也起一定的生理作用。

关键词:陆地棉脂肪酸合成基因克隆表达量非生物胁迫

单位:中国农业大学农学与生物技术学院/杂种优势研究与利用教育部重点实验室/作物遗传改良北京市重点实验室 北京100193 新疆农垦科学院棉花研究所/农业部西北内陆区棉花生物学与遗传育种重点实验室 新疆石河子832000 湖北省农业科学院经济作物研究所 武汉430064

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