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非变性原位杂交技术在芝麻染色体识别上的探索与应用

刘艳阳 崔承齐 梅鸿献 武轲 郑永战 中国农业科学 2013年第17期

摘要:【目的】研究和确定芝麻ND-FISH最优试验条件,并对其在芝麻染色体识别中的可行性进行探索。【方法】以寡聚核苷酸(AC)8为探针,研究不同洗脱强度、酶解时间和杂交时间对ND-FISH的影响,确定芝麻ND-FISH最优试验方案。【结果】芝麻ND—FISH最优方案:制片在浓度100μg.mL^-1RNaseh酶解1h,探针浓度6μL(20ng.μL^-1),杂交4h,4×SSC/0.2%Tween20溶液洗脱10min;18条染色体存在(AC)8杂交信号,其中,14条染色体上存在较强杂交信号,4条染色体上有较弱杂交信号,结合染色体长度及臂比,18条染色体可有效识别。【结论】利用ND-FISH技术、以(Ac)。为探针成功识别栽培芝麻的18条染色体。

关键词:芝麻寡聚核苷酸染色体核型

单位:河南省农业科学院/河南省芝麻研究中心 郑州450002

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