【目的】深入了解棉花花药发育的分子机制，并为其不育机理的研究提供参考序列。【方法】构建棉花花药全生育期的均一化全长cDNA文库并测序获得9896条高质量的EST，利用生物信息学和荧光定量相结合法对所得数据进行系统分析。【结果】该cDNA文库库容为1．2×10^7，插入片段分布在1—3kb。将所测得的高质量EST进行拼接得到6643条unigenes，平均长...
【目的】创造块茎高支链淀粉或纯支链淀粉含量的转基因马铃薯材料。【方法】以构建的由Patatin启动子驱动的pBIl21g-PghBI为干扰表达载体，采用农杆菌介导法转化马铃薯优良品种甘农薯2号。用PCR、Southern blotting、半定量RT—PCR和实时荧光定量PCR技术检测转基因植株，并对转基因植株的微型薯进行淀粉含量的测定。【结果】通过农杆菌介导法获...
【目的】研究接种菌根与砷胁迫条件下玉米叶片组织相关蛋白质的变化。【方法】以玉米植株叶片为材料，采用双向凝胶电泳技术（2-DE）研究玉米叶片蛋白表达谱对丛枝菌根（AM菌根）接种和（或）砷胁迫的应答。【结果】经软件分析并搜索NCBInr数据库，结果显示，砷胁迫植株叶片中有7个蛋白点被成功鉴定，其中有3个未知蛋白，其余4个分别为2-phospho...
【目的】构建盐土棉田棉花水分胁迫指数模型，以确定适宜的棉花水分运筹方式，为提高盐碱地棉花产量和品质提供理论依据。【方法】试验于2008—2009年在江苏南京（118°50′E，32°02′N）南京农业大学牌楼试验站进行，以耐盐品种中棉所44和盐敏感性品种苏棉12号为材料，将碳酸钠、重碳酸钠、氯化钠、氯化钙、氯化镁、硫酸镁、硫酸钠7种盐类等摩尔...
【目的】研究从土壤中分离出来的具有广谱抗菌活性的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌株NJ-18与作物互作关系，并观察外源导入绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）基因的NJ-18菌株在小麦根部的定殖能力。【方法l首先使用十二烷基硫酸钠（SDS）消解NJ-18的质粒，然后采用化学法导入gfp分子标记，并采用激光共聚焦显微镜检测该标...
【目的】通过原噬菌体区域高度变异的基因位点研究柑橘黄龙病病原菌亚洲种（‘Candidatus Liberibacter asiaticus’）的种群分化，探讨病原菌种群遗传多样性水平和遗传结构。【方法】基于2种原噬菌体类型（SCl和SC2）对应的超变异基因区域设计2对弓】物（Lap—TF／Lap—T卜R1和Lap—TJ—F／Lap—TJ—R2），对中国不同柑橘产区的224个‘Ca．L．a...
【目的】克隆斜纹夜蛾受翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）基因，分析其序列特征，为深入研究该基因奠定基础。【方法】利用RACE末端快速扩增技术，在斜纹夜蛾卵巢细胞中克隆TCTP基因的全长。根据不同物种间TCTP基因的同源性来构建进化树，并在原核细胞中对斜纹夜蛾TCTP进行表达。【结果】克隆得到斜纹夜蛾TCTP基因全长cDNA，登录号为HQ896486．1。序列...
【目的】研究免耕、深松和翻耕两两组合而成的3种不同轮耕模式对黄土高原旱作麦田土壤物理结构与稳定性影响。【方法】于2007—2012年在陕西渭北旱塬麦田开展夏闲期免耕／深松、深松／翻耕和翻耕／免耕3种隔年交替的轮耕试验，测定土壤容重，并应用干筛和湿筛法分析土壤团聚体不同粒级含量、大小和分形维数。【结果】与耕作试验前相比，5年免耕...
【目的】探索农耕地撂荒对土壤微量元素演变特征的影响，为该地区植被恢复中土壤质量评价和生态恢复的持续健康发展提供科学依据。【方法]以黄土丘陵区不同撂荒年限的坡耕地为研究对象，分析农耕地撂荒后不同坡向土壤4种有效态微量元素的变化趋势。【结果】黄土丘陵区坡耕地撂荒后，阴坡由于土壤温度较低，含水量较大，植被生长旺盛。有机碳、全...
【目的】揭示大田栽培条件下，苹果矮化中间砧幼树生长及对不同形态”N的利用、分配特性。【方法】以1年生官藤富士／SH6／平邑甜茶幼树为试材，采用15N同位素示踪法，研究硝态氮和铵态氮对苹果幼树生长及15N利用和分配的影响。【结果】施肥46d后，15NO3-15N利用率为3．43％，显著高于15NH4-15N利用率（1．19％）。施用NO3--N后树体生物量、根冠...
【目的】研究不同程度的缺锌胁迫对大田苹果树叶片的叶绿素含量、光合速率、叶绿素荧光特性等的影响，进一步揭示缺锌对叶片光系统的伤害机理。【方法】以大田盛果期‘红富士／平邑甜茶’正常树和缺锌小叶病树为试材，对叶片锌含量、叶绿素含量、净光合速率、荧光参数等指标进行测定。【结果】缺锌胁迫下，苹果叶片叶绿素含量下降，单叶面积、比...
【目的】研究苹果痘斑病果实和健康果实不同部位ca、K和Mg含量及离子微区分布，分析ca定位与痘斑病发生之间的关系，探讨果实产生痘斑病的主要原因。【方法】以‘短枝富士’苹果（Mslus domesticacv．Spur Fuji）为材料，用原子吸收法测定患痘斑病果实（简称病果）与健康果实（简称健果）的顶、中、底部果皮组织中Ca、K和Mg含量。同时，用x射线...
【目的】研究生物炭和生物有机肥处理对平邑甜茶根系及微生物功能多样性等指标的影响，为果园可持续发展提供参考依据。【方法】采用盆栽试验，添加生物炭和生物有机肥处理，分析不同生物炭和生物有机肥处理对植株根系、土壤微生物群落功能多样性的影响。【结果】施用生物有机肥和生物炭均可增加细吸收根量、细吸收根面积、土壤和根际可培养微生...
【目的】解决不同包装单元的聚合与拆分导致的流通过程追溯精确度不高的问题，为实现蔬菜全程质量安全追溯体系的建立奠定基础。【方法】采用条码和无线射频识别（RFID）分别对不同包装单元进行标识，开发便携式流通信息采集系统和升级蔬菜企业信息管理系统。【结果】实现了RFIDTID与小包装产品追溯号之间的关联及流通过程信息采集，从而提高流...
【目的】解析肌原纤维蛋白在腊肉加工过程中主链构象及微环境的变化。【方法】运用拉曼光谱，对酰胺I、III带及S—C、C-C、C-N伸缩振动谱带进行分析，比较1760、1850／1830的强度变化。【结果】在加工过程中，肌原纤维蛋白α-螺旋的含量显著下降，β-折叠的最终含量显著增加，β-转角及无规则卷曲含量无明显变化，主链C-C的α-螺旋及C-N伸缩振动强度...
【目的】探讨烟酰胺（nicotinamide，NIC）和罗格列酮（rosiglitazone，RSG）对猪前体脂肪细胞凋亡的作用及分子机制，寻找通过凋亡方式调控脂肪细胞数目进而控制生脂的新途径。【方法】分别用含有0、0．2、0．4、0．6、0．8和1．0mmol·L^-1RSG的培养基处理猪前体脂肪细胞，在处理后的48h，对不同处理组细胞进行Hoechst33258和Annexin—V-FITC／...
【目的】研究父源印记基因在牛早期胚胎中的表达模式。I方法】利用／leal-timePCR技术，检测6has，Grb10和Xist这3个父源性印记基因在牛体外受精（Invitro Fortilization，IVF）和孤雌激活（Parthenogcnetic Activation，PA）胚胎各发育阶段的表达情况。【结果】对于IVF和PA两种来源的牛胚胎，arias在胚胎各发育阶段的表达没有明显差异；Grb10在...
【目的】通过分析西门塔尔牛肌内脂肪和皮下脂肪差异表达miRNh，及对重要的候选miRNA-27b进行靶基因预测及相关生物信息学分析，探索miRNA在动物肌内脂肪生长、发育过程中的作用及其调控机制。【方法】利用miRNA微阵列芯片技术对肌内脂肪和皮下脂肪miRNA表达谱进行检测和分析以筛选差异表达miRNA；qRT—PCR方法验证4个在肌内脂肪显著高表达的候...
【目的】监测陕西省猪流感的流行与传播情况，为猪流感研究提供参考。【方法】从生猪养殖场和屠宰场表观健康猪中随机采取猪鼻／气管拭子样本，经SPF鸡胚分离，对HA阳性样本进行猪流感病毒RT—PCR鉴定。测定分离株全基因序列，通过MEGA4构建基因进化树，并进行遗传变异分析。【结果】从500份样本中分离鉴定出6株HINI流感病毒，病毒分离率为1．2...
【目的】采用家蚕丝腺生物反应器这一蛋白高效表达系统，尝试建立一种高效、低廉、稳定生产狂犬病病毒核蛋白（RVNP）的技术体系，为生产基因工程疫苗奠定基础。【方法】通过RT-PCR方法克隆获得RVNP序列，采用家蚕丝胶蛋白基因（Serl）启动子为特异性启动子，将刀卿构建到含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）筛选标记基因的piggyBac转座子表达载体（...
【目的】通过对黄淮小麦品种农艺性状演变趋势分析，研究黄淮小麦适应气候变化自然选择和人工高产育种选择的规律。【方法】记载二倍体、四倍体、六倍体小麦进化材料和现代小麦品种不同生育期的农艺性状，收获后测定产量性状。【结果】小麦在进化过程中，分蘖和叶片数有减少的趋势。二倍体一四倍体一六倍体野生种，株高有增加的趋势；从六倍体野...
【目的】基于逆转录环介导等温扩增技术（Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification，RT-LAMP）建立甘薯褪绿矮化病毒（Sweet potato chlorotic stunt virus，SPCSV）西非株系（WestAfrican，wA）的可视化检测方法。【方法】针对SPCSV西非株系（SPCSV-WA）的卯核苷酸序列设计4条5l物，以感染SPCSV-WA甘薯叶片总RNA为模板，...
【目的】探讨JAK—STAT通路中瘦素（Leptin，LEP）和信号转导子和转录激活子5a（Signal transducers and activators of transcription，STATSa）基因在崂山奶山羊群体中的遗传变异、交互作用及与生产性状的关联性。【方法】以174只崂山奶山羊泌乳母羊为实验群体，其中89只来自种羊场，有完整的产奶量记录；85只来自育种户。利用DNA混池测序和候...
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