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白菜型冬油菜铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)基因的克隆及表达分析

曾秀存 孙万仓 孙佳 许耀照 方彦 史鹏辉 杨刚 孔德晶 武军艳 刘自刚 中国农业科学 2013年第21期

摘要:【目的】了解SOD酶蛋白家族Fe-SOD在超强抗寒冬油菜中的表达情况及其在低温胁迫下的作用。【方法】采用RT—PCR技术克隆超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号Fe-SOD的cDNA序列。对该序列进行生物信息学分析,采用半定量以及相对定量RT—PCR研究Fe-SOD在低温胁迫下的表达模式,采用氮蓝四唑(NBT)光还原法测定冬油菜叶片和根中的总SOD酶活性。【结果】获得尼硼GenBank登录号为KF178713,该基因cDN段全长645bp,包含一个639bp完整的开放阅读框,编码212个氨基酸的蛋白质,与白菜(chiifu)的蛋白质氨基酸序列同源性高达99%。该基因编码的酶蛋白是1个主要由α螺旋组成的亲水性稳定蛋白,无信号肽,无跨膜结构域。Fe-SOD表达模式分析显示初期低温胁迫下(4℃),该基因上调表达,继续低温胁迫处理(-4℃和-8℃),Fe-SOD表达量受到抑制。总SOD酶活性测定显示冬油菜根中酶活性高于叶片,以利于冬油菜安全越冬。【结论】从白菜型冬油菜克隆的Fe-SOD具有已知物种Fe-SOD的特征。Fe-SOD在冬油菜品种陇油7号抗寒过程中起作用。

关键词:白菜型油莱低温表达分析sod活性

单位:甘肃农业大学农学院 中国兰州730070 河西学院农业与生物技术学院 中国甘肃张掖734000 Department of Plant Sciences University ofSaskatchewan Saskatoon Saskatchewan Canada S7N5A8)

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