摘要：【目的】fao1编码Candida cloacae中一种含铁辅基的长链脂肪醇氧化酶。通过构建该基因的衣藻核转化表达载体进行转化，根据表达蛋白的生物活性判断faol能否充分利用衣藻叶绿体中的铁元素行使功能；同时也为需铁固氮酶基因的研究提供方向。【方法】通过PCR把PsaD信号肽、fso1、His-tag标签融合，连接到pDBIe载体上；采用玻璃珠转化法，将重组子导入菜茵衣藻（CWl5）中；经博来霉素筛选后，获得转基因植株。运用PCR和RT—PCR法检测了转化衣藻，并且用亲和层析柱纯化蛋白，同时进行FA01活性检测。【结果】重组质粒测序完全正确；PCR和RT-PCR检测转化衣藻基因组DNA和RNA，扩增片段与预期相符；转化衣藻FA01蛋白纯化洗脱液使ABTS（2，2’-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐）底物反应变色。【结论】成功构建了信号肽、FA01和His-tag融合基因的衣藻核转化表达载体，重组质粒已整合到莱茵衣藻基因组中，并成功转录，纯化的蛋白检测有活性。

关键词：长链脂肪醇氧化酶 信号肽 衣藻核转化 

单位：中国农业科学院生物技术研究所 北京100081