摘要：【目的】明确虫生真菌球孢白僵菌（Beauveria bassiana）疏水表面结合蛋白HsbA（hydrophobic surfacebinding proteinA）的致病过程。【方法】对HsbA进行克隆、亚克隆和原核表达，根据纯化后的蛋白制备多克隆抗体并进行抗原性分析，利用免疫电镜对HsbA蛋白进行定位观察。【结果】原核表达系统成功诱导了白僵菌的HsbA融合蛋白，制备多克隆抗体经Western杂交分析表明，该多抗能特异性识别目的蛋白。免疫电镜结果显示，HsbA蛋白在孢子和菌丝中呈随机分布。正常生长状态下，菌丝中的HsbA蛋白数量要明显多于孢子中被标记的数目，此外，孢子在侵染状态和正常生长状态下的HsbA蛋白数量也有显著差异，侵染状态下孢子的HsbA蛋白表达量更高，但菌丝在这2种状态下均呈现高表达。感染虫体中HsbA蛋白被标记的部位集中在体壁。【结论】原核表达实现了Hsbh蛋白的高效表达，且制备的多克隆抗体具有较好的免疫原性。此外，免疫定位表明HsbA蛋白-9菌丝的生长有关，并在白僵菌致病过程中参与了吸附作用，其作用部位位于昆虫体壁。

关键词：球孢白僵菌 hsba蛋白 原核表达 多克隆抗体 免疫电镜 

单位：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 北京100193 北方民族大学生物科学与工程学院 银川750021