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含有扩增内标的食品中猪肉和鸡肉成分Taqman探针实时荧光PCR检测方法的建立

何玮玲 胡序建 程欣 黄明 周光宏 中国农业科学 2013年第21期

摘要:【目的】建立含有扩增内标(IAC,Internal amplification control)的用于食品中猪肉和鸡肉成分鉴别的Taqman探针实时荧光PeR检测方法。【方法】分别基于猪的betaactin基因和鸡的transforming growth factor基因设计引物和探针;考察引物和探针的特异性与灵敏度;设计并构建扩增内标,优化体系中扩增内标浓度,建立内标实时荧光PCR体系;使用该检测体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板进行检测评价;应用该体系对市售38份样本进行盲样检测。【结果】含有扩增内标的Taqman探针实时荧光PCR体系能有效地进行食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测,非目标物种在40个循环内均无出现扩增,检出限均为0.5ngDNA;该体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板检测无显著差异;对市售食品样本的鉴别验证了方法的实用价值。【结论】该方法准确稳定,可用于食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测。

关键词:扩增内标检测实时荧光pcr鸡肉成分猪肉成分

单位:南京农业大学食品科技学院/肉品加工与质量控制教育部重点实验室 南京210095 河南省商丘市技术监督局/国家面粉及制品质量监督检验中心 河南商丘476000

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