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山羊卵巢富集ch-imiR-1OOf-5p的鉴定与表达分析

娜日苏 刘广 向阳 赵海林 吴亭 赵金红 李凡 黄选洋 孙晓卫 郑姣 张家骅 中国农业科学 2013年第22期

摘要:[目的]探讨山羊卵巢中富集的miR-100及预测的靶基因与山羊卵巢功能及卵泡发育的潜在关系,为山羊繁殖机理研究提供数据。[方法]以山羊卵巢组织为材料,通过miRNA的分离、克隆及测序得到山羊卵巢中表达的miR-100,采用RT—qPCR进行表达检测,用生物信息学方法预测miR-100的靶基因及其功能。[结果]①山羊卵巢的测序结果中,-段成熟体为2Int的序列与果蝇dan—miR-100高度同源,将其命名为ohi-miR-100f-5p,其前体位于基因组负(-)链上,长度为59bp,定位于山羊CM000899.1:33997894—33997914序列;②chi—miR-100f-5p在山羊卵巢、垂体及心脏等组织中均有表达,说明此miRNA不是卵巢组织所特有;心脏和垂体组织中均有较高表达,其次是卵巢,而在肝脏、脾脏、肺及肾脏中表达显著低于卵巢(P〈0.01);在单产羔内蒙古绒山羊卵巢中chi-miR-100f-5p的表达极显著高于高繁殖力大足黑山羊卵巢(尸〈0.01);③chi—miR-100f-5p主要靶作用于整合蛋白D1亚基基因及垂体特异性转录因子1基因,可能参与整合蛋白信号通路,促进垂体内分泌细胞的生长与分化,调节下丘脑-垂体-性腺轴激素分泌。[结论]山羊卵巢中新发现的chi—miR-100f-5p可能是与繁殖调控有关的重要候选miRNAs之-。

关键词:卵巢

单位:西南大学动物科技学院、重庆市牧草与草食家畜重点实验室、重庆市草食动物资源保护与利用工程技术研究中心 重庆400715 重庆市畜牧科学院 重庆400716

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