摘要：【目的】检测‘亚历山大’葡萄果实中萜类物质的种类和含量，分析果实发育过程中单萜类物质的积累与相关基因表达的关系，为揭示玫瑰香型葡萄香气物质的积累规律和香味育种奠定基础。【方法】从果实转色后至成熟期，每周取样一次，每次随机取样80—100粒，去籽去梗后榨汁，离心取上清液用于香气物质测定，使用顶空固相微萃取方法萃取样品中的挥发性成分，对采集到的质谱图用NIST 05谱库检索，并根据已有标样的色谱保留时间和保留指数，确定香气成分的化学组成，利用已有的化合物制备标准曲线进行定量。根据DXS的ORF序列设计引物，以充分成熟的样品RNA反转录获得的cDNA为模板，通过多次独立PCR扩增获得‘亚历山大’DXS的ORF片段，根据测序结果分析单核苷酸多态性位点。根据萜类生物合成途径中的8个关键酶基因序列设计引物，使用Ubiquitin，EF1-α和GAPDH 3个看家基因做为内参，进行实时定量PCR，检测这些基因的转录丰度。【结果】从转色后至成熟期，在检测到的所有单萜中里那醇和香叶醇的含量远高于其它单萜，多种萜类浓度逐渐上升，其中里那醇、月桂烯、柠檬烯上升6—8倍，香叶醇、萜品醇、香叶醛和萜品油烯上升2—3倍，玫瑰醚和橙花醛含量变化较小，果实中里那醇、香叶醇、氧化玫瑰和月桂烯的含量高于嗅闻阈值。在单萜生物合成早期途径中，DXS1的表达从转色开始缓慢上升，在花后15周迅速上调，上升约5倍。DXS3则从12周开始迅速上升。DXR表现出波动变化规律。HDR的表达量在前期合成酶基因中是最高的，能达到DXS1、DXS3、DXR的10—20倍；在合成途径中期的2个基因FPPS和GPPS，从转色后至成熟期表达量持续上调，FPPS的表达量上升了4倍，GPPS的表达量上升了2倍；在合成途径的后期，Liner-syn和Terp-syn在花后的11—15周都出�

关键词：亚历山大葡萄 萜类 生物合成 反转录聚合酶链式反应 

单位：北京市农林科学院林业果树研究所 北京100093 北京林业大学生物科学与技术学院 北京100083 中国农业大学食品科学与营养工程学院 北京100083