摘要：【目的】对不同毛色绵羊皮肤中的阿黑皮素原（proopiomelanocortin，POMC）进行定位和表达差异分析，确定POMC与毛色形成的关系，进一步丰富有关哺乳动物毛色形成机制的理论知识。【方法】选取年龄相近的雄性黑色和白色成年绵羊各3只，用取皮器分别在臀部采集皮肤组织3块，对其中一块制作石蜡切片后采用免疫组织化学法确定POMC在不同绵羊皮肤中的定位，另两块置于液氮中冻存后分别提取皮肤总RNA和总蛋白，总RNA经反转录成cDNA后，经NCBI分析比对后设计POMC特异性PCR引物，采用QRT-PCR方法检测POMC基因在mRNA水平的表达差异；总蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳后，采用Western blotting方法加入POMC多克隆抗体检测POMC在蛋白水平的表达差异，得出的数据用SPSS19.0软件进行差异显著性分析，探讨POMC对毛色形成机制的调控作用。【结果】免疫组织化学结果显示POMC在黑色和白色绵羊皮肤中均有表达，且表达部位都位于毛囊根鞘周围和表皮的皮肤角质形成层细胞内；QRT-PCR结果显示POMC在黑色绵羊皮肤中mRNA的相对表达量为2.5004±0.2577＊＊，而在白色绵羊皮肤中POMC的mRNA的相对表达量为1.0032±0.0350，黑色绵羊皮肤中POMC的mRNA的相对表达量为白色绵羊皮肤的2.5倍，二者表达差异极显著（P＜0.01）；Western boltting结果显示黑色绵羊皮肤POMC蛋白水平相对表达量为1.5253±0.0426＊，而白色皮肤中POMC蛋白水平相对表达量为1.0005±0.0180，黑色皮肤POMC蛋白表达量是白色皮肤的1.55倍（P＜0.05），两者差异显著。【结论】试验表明POMC可在黑色和白色绵羊皮肤中正常表达，且其表达位置一致，但POMC在不同毛色绵羊皮肤组织中mRNA和蛋白的表达水平存在一定的差异，表明POMC的表达量变化会在一定程度上影响毛色的生成。

关键词：绵羊 pomc western blotting 免疫组织化学 

单位：山西农业大学动物科技学院 山西太谷030801 山西农业大学信息学院 山西太谷030801