摘要：【目的】明确油菜素内酯对Ca2＋分布的影响，分析油菜素内酯对影响钙稳态的编码Ca2＋通道和Ca2＋-ATPase相关基因表达量的变化，明确油菜素内酯对钙稳态的影响。【方法】采用焦锑酸钙沉淀法对油菜素内酯（brassinosteroid，BR）处理后Ca2＋的分布进行细胞化学定位；利用real-time PCR技术对调控细胞内Ca2＋水平的位于细胞质膜、液泡膜和内质网上的编码Ca2＋-ATPase的基因及位于细胞质膜、液泡膜和溶酶体上的编码Ca2＋通道基因的表达量进行分析。【结果】在未经BR处理的拟南芥细胞中，Ca2＋主要分布在细胞壁、细胞间隙和液泡中，细胞质和叶绿体中仅有少量Ca2＋的分布；在1μmol·L-1 BR处理3 h后，Ca2＋呈聚集状分布在液泡膜和细胞质膜附近，同时细胞质和叶绿体上的Ca2＋分布增多；BR处理6 h后，细胞质和叶绿体中Ca2＋分布继续增加，细胞壁中Ca2＋分布有所减少；BR处理9 h后，细胞质和叶绿体中Ca2＋分布减少，细胞间隙和液泡中Ca2＋分布有所增加，但细胞壁中Ca2＋分布明显减少，说明BR具有移除细胞壁中Ca2＋的作用。CNGC2和CNGC12是细胞质膜上编码Ca2＋通道的基因，在1μmol·L-1BR处理3 h后，CNGC2和CNGC12的表达量均明显下降；处理6 h后，CNGC2和CNGC12的表达量有所恢复；处理9 h后， CNGC2和CNGC12的表达量明显增加。TPC1和TPC2分别是液泡和溶酶体上钙离子通道相关基因，TPC1和TPC2的表达量在1μmol·L-1 BR处理3 h后也表现为明显下降，但TPC1的表达量在BR处理6 h后的表达量明显高于未用BR处理的对照，而TPC2的表达量直到BR处理9 h后才明显升高。可见，BR可阻滞细胞质中Ca2＋浓度的快速上升，液泡膜上编码Ca2＋通道基因的表达恢复早于细胞质膜和溶酶体上的Ca2＋通道基因，说明液泡中Ca2＋大量进入细胞质的时间早于胞外钙库和溶酶体等胞内细胞器。ACA8和ACA10是定位在

关键词：油菜素内酯 钙离子 钙离子通道 钙离子泵 拟南芥 

单位：河北农业大学生命科学学院 河北保定071001