摘要：【背景】马铃薯是最重要的块茎类粮食作物。栽培马铃薯以四倍体为主,但四倍体遗传和薯块繁殖增加了马铃薯改良的难度。因此越来越多的科学家呼吁在二倍体水平进行马铃薯的再驯化,将马铃薯驯化成种子繁殖作物。自然界中存在4个二倍体马铃薯原始栽培种,这些二倍体栽培种中蕴含着丰富的遗传变异,但是它们的遗传转化体系尚未成熟。【目的】建立高效的二倍体栽培马铃薯遗传转化体系,为二倍体马铃薯优良等位基因和分子育种提供工具。【方法】以二倍体栽培种马铃薯（Solanum phureja）CIP 703541为试验材料,利用绿色荧光蛋白基因（green fluorescent protein,GFP）作为报告基因,对遗传转化体系进行摸索,主要包括：预处理培养时间、诱导再生的激素比例、抗生素浓度以及转化效率。另外,利用同样的激素组合对17份不同基因型的二倍体马铃薯原始栽培种进行了测试,比较各个材料在不同激素浓度条件下的再生效率,筛选出再生效率较高的激素组合进行大量遗传转化;对再生苗进行生根筛选、荧光观察和PCR鉴定,统计阳性植株的概率。用流式细胞仪检测阳性植株的倍性,以分析再生植株发生染色体加倍的频率。【结果】预处理培养时间为2 d的外植体浸染效率最高。二倍体材料CIP 703541最适合再生出芽的激素配方为2.0 mg·L^-1玉米素（zeatin,ZT）﹕0.01 mg·L^-1奈乙酸（naphthaleneacetic acid,NAA）。再生阶段抗生素卡那霉素（kanamycin,Kan）的最适筛选浓度为100 mg·L^-1,生根阶段的最适筛选浓度为50 mg·L^-1。通过对不同基因型进行筛选,获得3份再生能力较强的二倍体马铃薯材料（CIP 703308、CIP 703312和CIP 703541）。它们响应的激素配方各不相同,在添加了100 mg·L^-1卡那霉素的再生培养基中,3份材料的再生效率分别为45%、40%和52%。通过大规模遗传转化证明,3份材料的转化率分别

关键词：二倍体马铃薯 遗传转化 染色体加倍 

单位：云南师范大学生命科学学院/马铃薯科学研究院; 昆明650500; 中国农业科学院深圳农业基因组研究所; 广东深圳518120