摘要：【目的】外施赤霉素（GA）是生产上辅助解除牡丹花芽休眠进行反季节盆花生产的常用手段，赤霉素如何发挥作用解除牡丹花芽休眠是未解的科学问题，本文旨在明确赤霉素是否通过表观遗传方式参与内休眠调控。【方法】从DNA甲基化入手，以4年生‘鲁菏红’为材料，500 mg·L^-1的GA3处理花芽，并在处理后0.5、1、3和5 d后取健壮顶芽，CTAB法提取花芽DNA，HPLC技术测定GA3处理后牡丹花芽DNA甲基化水平的变化；利用转录组分析结合RACE技术得到牡丹3种DNA甲基转移酶基因PsCMT、PsMET、PsDRM和DNA去甲基化酶基因PsROS1的序列，生物信息学方法比对基因序列并分析可能的结构域，MEGA 5.0构建系统发育树；以Actin为内参，利用qPCR方法分析其组织表达特性和对GA3的响应。【结果】3种DNA甲基转移酶基因（Dnmts）的开放阅读框长短不一，PsCMT、PsMET、PsDRM开放阅读框长度分别为1 118、1 056、2 175 bp，编码的氨基酸数目分别为372、351、724。3种DNA甲基转移酶均有甲基转移酶结构域。而DNA去甲基化酶基因PsROS1的序列较长，开放阅读框为6 636 bp，编码2 211个氨基酸。PsROS1上存在保守的DNA糖基化结构域。系统发育分析表明，牡丹中的PsCMT和PsDRM蛋白与葡萄的VvCMT2蛋白亲缘关系最近，PsMET和PsROS1与大部分木本植物聚为一支，与烟草等距离较远。PsCMT、PsMET、PsDRM在牡丹初花期的各个组织（根、茎、叶、苞片、萼片、花瓣、雄蕊、心皮）中均有表达，其中在牡丹根中表达量较高，而PsROS1在心皮中表达量最高。GA3处理5 d，牡丹花芽迅速萌动，60 d时萌动率为97.5%，成花率为92.5%；对照20 d时才有少量花芽萌动，至60 d时萌动率仅为23.1%。GA3显著降低了牡丹花芽DNA甲基化水平（P＜0.01），从处理前的38.9%降至处理5 d时的28.7%；GA3处理提高了PsCMT和PsROS1的表达水平，降低了PsDRM的表达水平，而PsM

关键词：牡丹 dna甲基转移酶 psros1 赤霉素 dna甲基化 

单位：青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室; 山东青岛266109