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稻水象甲卵巢内β1-微管蛋白基因cDNA全长的克隆及定量表达分析

于奎峰 李红亮 杨璞 崔旭红 祝增荣 商晗武 中国水稻科学 2010年第06期

摘要:利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别对中国的孤雌生殖型和美国的两性生殖型稻水象甲卵巢内β1-微管蛋白基因进行了克隆,获得的cDNA全长分别为1727bp和1730bp,均包含1344bp的完整开放阅读框(ORF),编码447个氨基酸,理论分子量约50kD,等电点4.54。同源性分析表明,克隆的β1-微管蛋白基因与其他昆虫的β微管蛋白基因在氨基酸水平上是高度同源的,相似性介于95%~100%。荧光定量PCR分析表明,β1-微管蛋白在孤雌生殖型稻水象甲卵巢内的表达量(3.14×107copies/μL±0.66×107copies/μL)显著高于两性生殖型稻水象甲(5.08×106copies/μL±0.47×106copies/μL)。推测该基因的差异表达对于稻水象甲孤雌生殖过程中纺锤体的组装具有重要意义。

关键词:稻水象甲cdna克隆定量表达

单位:中国计量学院生命科学学院/浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室 浙江杭州310018 浙江大学昆虫科学研究所 农业部作物病虫分子生物学重点开放实验室 浙江杭州310029

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