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稻曲病菌 T-DNA 插入突变体 B1464插入位点分析

王亚会 刘永锋 陆凡 俞咪娜 黄磊 郑梦婷 于俊杰 尹小乐 中国水稻科学 2015年第03期

摘要:以稻曲病菌致病力丧失的突变菌株 B1464为材料,对其生物学形态和分子遗传变异进行分析.B1464田间接种表现为不致病,与野生型菌株相比,在营养贫瘠的 MM 培养基上生长速率没有显著差异,而在 PSA 和 TB3培养基中生长速率较慢,并且在 PS 液体培养基中产孢能力下降,同时突变菌株的分生孢子与野生型相比形态和大小均发生变化.Southern 杂交结果显示 T-DNA 在突变菌株 B1464中以单拷贝形式插入,利用 TAIL-PCR 技术扩增得到的紧邻 T-DNA 两侧的侧翼序列在野生型中不相邻,与野生型菌株基因组比对发现突变菌株插入位点处丢失约20 kb 的 DNA 片段.RT-PCR 结果表明突变菌株中 T-DNA 插入位点两侧基因表达量均下调.推断突变菌株 B1464的致病能力丧失可能是由于 T-DNA 的插入导致了染色体重排及破坏了某些基因的正常表达.

关键词:稻曲病菌插入突变致病力苹果酸合成酶铜转运蛋白

单位:江苏省农业科学院植物保护研究所 南京210014

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