使用生物信息学预测结合实验验证的策略筛选鉴定人新的分泌蛋白基因.用SignalP、SOSUI、PSORT和BLAST等程序对UniProt蛋白数据库进行生物信息学分析,筛选出用于实验验证的14个功能未知基因.采用RT-PCR方法,克隆得到14个基因的全长编码序列,并构建到真核表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-His质粒.采用蛋白质印迹与免疫荧光分析,检测到其中7个基因的表达....
小分子双链RNA(siRNA)可以高效、特异地沉默目的基因表达,为基因功能研究及基因治疗提供了新工具.近年来研究表明针对基因mRNA不同位点随机设计的siRNA在作用效果上存在差异,siRNA作用效果有序列依赖性,而且与其在基因mRNA上的结合部位的高级结构有关,与反义核酸发挥作用的靶点依赖性类似.这一性质对设计高效siRNA为基因功能和基因治疗研究提供...
对病毒复制机制研究的一个重要方面是病毒的组装和从细胞表面出芽.过去的20年大量研究证实反转录病毒Gag蛋白对病毒的组装和出芽起着决定性作用.Gag蛋白的多个功能域已经被证明在病毒组装的不同时期发挥作用.马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus,EIAV)p9是Gag蛋白C端的一个小蛋白,在其之上的L域是与病毒释放直接相关的蛋白功能区域...
启动子是位于基因5′端并负责该基因转录的DNA序列.诱导性启动子中有一些对伤害、真菌侵染、紫外线照射、激素等做出应答反应的顺式作用元件,被称为模序.已在植物启动子中鉴定出许多与诱导表达相关的模序,如伤害诱导模序,真菌诱导模序,植物激素诱导模序和光诱导模序等.这些模序作为启动子的顺式元件对各种诱导因子做出反应、调控基因的表达.
玉米细菌性枯萎病是影响玉米生产的重要病害,该病害通过带菌的种子进行远距离传播,对该病菌的检测成为防止和控制该病害的重要手段.介绍现有的检测该病菌的各种方法,即黑色素选择培养法、double-sandwich ELISA以及RAPD-PCR,LCR-PCR,Nested-PCR,multiple PCR和荧光实时PCR等分子生物学检测方法,并对这些方法的特性进行比较和探讨.
论述近年来在拟南芥、水稻等模式植物中赤霉素信号转导的研究进展.通过对赤霉素相关突变体的生理研究,鉴定出几个介入赤霉素信号转导过程的重要基因,并对这些基因的产物进行分析,根据相应的蛋白特征结构域,推导了它们可能具有的功能.利用双突变体,分析了这些基因的上下游关系,确定了在植物中,GA信号转导的几个途径.在此基础上提出了赤霉素信号转...
核黄素(维生素B2)为天然水溶性的B族维生素,是维持机体正常代谢所必须的物质,具有重要的生理功能.目前核黄素的生产方法主要有化学合成法和微生物发酵法.其中微生物发酵法是后来发展起来的一种十分经济有效的方法,并在核黄素主产中开始占据主导地位.为进一步获得核黄素高产菌株,人们对核黄素合成基因及其表达调控的机制做了深入细致的研究,并以...
链霉菌除具有复杂的形态分化特征外,还可以产生多种具有重要应用价值的次级代谢产物,这两个过程密切相关.因此,链霉菌存在着原核生物中罕见的庞大而复杂的调控网络.链霉菌在遗传水平有三个层次的调控,分别是:途径特异性调控、多效调控和全局调控.阐明这些调控网络将为利用代谢工程手段提高次级代谢产物的产量并对其进行结构改造奠定理论基础,还...
反义技术利用DNA或RNA分子通过Watson-Crick碱基配对原则与目的基因的mRNA互补结合,通过各种机制使其降解或抑制其编码蛋白的翻译,从而抑制目的基因的表达.与基因敲除(gene knockout)等功能缺失性研究方法相比,反义技术具有投入少,周期短,操作简单等优点,因此受到了广泛的关注.对几种常用反义技术的研究进展及存在的问题进行概述.
人类基因组测序工作的完成,引起人们对蛋白质组研究的热忱.蛋白质作为生命活动的执行者,种类繁多,结构复杂,并且其活性与空间结构密切相关,需要更为先进的技术去研究和探索.近来出现的蛋白质芯片以并行、高通量检测、分析和处理蛋白质样品,发展迅速,应用前景广泛.介绍蛋白质芯片的种类、蛋白质固定的表面化学以及不同的检测方法,简述蛋白质芯片...
目的:探索肝素在脐带血CD34+细胞定向扩增巨核祖细胞中的作用.方法采用免疫磁珠法(MACS)分选CD34+细胞,在TPO,IL-11的扩增体系中加入肝素,巨核祖细胞集落分析(CFU-MK)测定巨核祖细胞扩增倍数,流式细胞仪检测巨核祖细胞分化过程中的特异性标记(CD34+,CD41a+,CD61+,CD34+CD41a+,CD41a+CD61+),巨核细胞特异性抗体(CD41a)免疫组化染色和透射电镜观察...
精子蛋白SP22与生殖功能密切相关.睾丸附睾毒物氯醇硝唑作用于大鼠生殖系统时,精子表面SP22大量脱落至附睾液中,导致生育力降低.深入研究发现SP22与生育力存在量的关系.从人睾丸组织中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出人睾丸组织中的SP22基因,连入pGEM-Teasy vector进行cDNA克隆测序.再亚克隆到pET-28a-c(+)vectors成功构建pET-28a-c(+)vectors/SP22...
目的:克隆并分析细菌性噬菌体ψ297的整合酶基因(int).方法:采用加接头的基因DN断为模板进行步移PCR,根据溶源性噬菌体ψ297的染色体DNA上类似于噬菌体933W的整合酶基因的一个40个核苷酸设计引物,进行扩增、克隆、亚克隆、测序和序列分析.结果:得到了噬菌体ψ297编码的整合酶基因(int)的完整序列,它的长度是1287bp,编码了428个氨基酸的Int蛋白质.将...
根据已有的资料显示LBP与LPS的结合位点位于其氨基末端的第91～100个氨基酸残基.在体外构建含有人LBP与LPS结合活性部分的穿梭质粒pBacmidtLBP,并且带上6×his的标签,用此穿梭质粒转染sf21昆虫细胞,获得重组病毒.然后用重组病毒液感染对数生长期的sf21昆虫细胞,72h后收获含有这种截断型人源化氨基末端LBP(NH-LBP)的培养上清.用金属亲和树脂纯化后...
为了比较不同来源乳腺特异表达载体的表达特性,将人溶菌酶(hLYZ)cDNA分别克隆入自行构建的p205C3载体和国外引进的pBJ41和pBC1载体.重组载体p205C3LYZ、pBJLYZ和pBCLYZ分别用25kDa PEI包裹后,通过尾静脉途径注射哺乳期小鼠.注射后72h采集乳样,经微球菌溶解实验证明,3组小鼠乳汁中hLYZ的表达量分别为87、69、60mg/L;从每组小鼠的12种组织提取总RN...
目的:探讨小鼠胚胎干(ES)细胞在无血清培养基中以单层粘附培养方式向神经分化的方法.方法:比较ES细胞在不同培养基中的生长情况,分析ES细胞在不同时间分化形成神经细胞的比例.结果:(1)DMEM/F12和Neurobasal/B27的1:1混合培养基最适合ES的生长.(2)单层粘附的ES细胞表达神经细胞粘附分子(NCAM)的比例随时间增长而增加,而nestin的表达先增加后下降....
为提高Xa因子对融合蛋白CBD-IGF和CBD-PACAP的酶切效率,以便高效释放非融合的重组多肽,利用基因工程技术在两个融合蛋白中Xa因子识别位点(Ile-Glu-Gly-Arg↓)前均引入7个氨基酸组成的富含甘氨酸柔性短肽(Gly-Thr-Gly-Gly-Gly-Ser-Gly).纤维素亲和层析纯化各个融合蛋白,比较Xa因子对引入短肽前、后融合蛋白的酶切效率.比较结果表明:短肽的引入不...
目的:利用Fugene 6基因转染试剂建立一种简便高效的人胚胎干细胞转染方法,并建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因的人胚胎干细胞系,为人胚胎干细胞研究提供一个非常有用的细胞模型.方法:通过Fugene 6基因转染试剂成功地将EGFP基因转入无饲养层培养的人胚胎干细胞中,嘌呤霉素筛选得到稳定表达EGFP...
以基因工程产品、抗体工程产品和细胞工程产品为主要代表的生物制药产业是发展最快的高技术产业之一,最近6年全球年销售额连续每年以15%～33%的速度增长,并在2004年突破400亿美元.生物技术药物在治疗肾性贫血、白细胞减少、癌症、器官移植排斥、类风湿关节炎、糖尿病、矮小症、心肌梗死、乙肝、丙肝、多发性硬皮病、不孕症、粘多糖病、戈谢病、...
由中国生物工程学会主办、中国医药生物技术协会、中国畜牧兽医学会和中国农学会协办的首届中国生物工程及应用技术高科技论坛暨创新成果、技术设备展览会于2004年12月13～15日在北京举行。来自全国各地约170名代表参加了会议。科学技术部中国生物技术发展中心主任王宏广教授等30位知名专家就生物产业与生物经济、
由科学技术部中国生物技术发展中心与欧洲生物技术联合会共同主办的中欧转基因植物安全与法规研讨会于2004年12月11～12日在北京召开。来自英国、法国、德国、瑞士、比利时、荷兰、爱尔兰、以色列、匈牙利、保加利亚等国的约20位欧洲专家和国内40余位专家出席了会议。与会专家分别阐述了欧洲和中国的生物安全研究现状、
由中国生物工程学会医学专业委员会与国家“863”计划医学生物技术专家组联合主办、军事医学科学院生物工程研究所承办、安徽省安科生物工程有限公司协办的“全国医药生物工程2004年学术研讨会”日前在安徽黄山市召开。来自全国相关研究院所和高校以及生物制药研发企业共计170名代表参加了本次会议。
日前，科技部、卫生部和国家食品药品监督管理局联合宣布，我国在世界上首次顺利完成SARS病毒灭活疫苗Ⅰ期临床研究。据SARS病毒灭活疫苗临床研究负责人林江涛教授介绍，Ⅰ期临床试验受试者共36名，均为21至40岁健康成人，男女各18人。免疫接种分16单位(SU)和32单位(SU)两种剂量，并设安慰剂对照组，各12人。
中国科学院微生物研究所利用获得2002年诺贝尔化学奖的表面加强激光解吸电离技术(SELDI)，分析发现早期SARS病人血清中含有异常表达的蛋白质，而这些特征“蛋白指纹”在其它如高烧、流感、肺炎或肺癌等呼吸道感染病人中不出现，从而为临床诊断SARS感染找到了新式武器。通过蛋白质质谱指纹分析法对几十份发烧1至7天的SARS病人、
第二军医大学曹雪涛教授负责的课题组与浙江大学免疫学研究所经多年合作研究发现了一种对人体免疫功能具有重要和独特调节作用的新型细胞群体——新树突状细胞亚群。
由西南农业大学与中科院北京基因组研究所合作的研究论文“家蚕基因组框架图”在近日出版的SCIENCE(306卷5703期)上发表。研究人员在基因组框架图的基础上，通过对家蚕的DNA信息进行分析，共获得了18510个基因，其中97％为新发现的基因，在发现的基因中，有五大类重要功能基因对蚕业发展至关重要。83个基因(包括41个母性基因)参与生长和发育调控...
若用户需要出版服务，请联系出版商，地址：北京市中关村北四环西路33号，邮编：100190。
