线上期刊服务咨询,发表咨询:400-808-1701 订阅咨询:400-808-1721

人mGluR1基因mRNA实时荧光定量PCR方法的建立

刀筱芳 伍雪英 李宁 徐亚欧 何进宇 龚玉来 高晋健 中国实用神经疾病 2008年第01期

摘要:目的建立代谢型谷氨酸受体1(mGluR1)基因mRNA表达水平的TaqMan real-time PCR检测方法。方法以争actin为内参基因,根据GenBank中人mGluR1及β-actin基因序列,分别设计了两套特异性引物和TaqMan探针,接着对反应的退火温度、引物浓度、探针浓度、Mg^2+浓度进行优化,然后以优化的条件建立相对定量标准曲线,并对该方法的稳定性进行分析。结果mGluR1及争actin基因的real-time PCR扩增效率分别为99.7%和100.0%;相对定量标准曲线的CT值线性范围分别为8.1~30.9和11.9~32.1,相关系数分别为0.999及1.000;批内及批闻变异系数〈6.4%。结论本研究所建立的针对mGluR1 mRNA表达水平的Taqman real—time PCR检测方法具有扩增效率高、稳定性好等特点,为进一步探索mGluR1的功能及其mRNA表达水平的变化和各种疾病发生、发展的相关性提供了方法学基础。

关键词:代谢型谷氨酸受体taqman探针pcrmrna

单位:西南民族大学生命科学与技术学院 成都610041 成都三六三医院神经内科 成都610041

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

中国实用神经疾病

统计源期刊

¥408.00

关注 45人评论|2人关注