摘要:目的探讨Notch3(Rg0C)突变蛋白诱导VSMC细胞凋亡机制。方法采用真核细胞转染技术将Flag-Notch3(wT)及Flag—Notch3(R90C)质粒转入大鼠主动脉血管平滑肌细胞A10,通过Western blot检测Beclin1及LC3II/LC3I;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞自噬空泡的变化;PI/Annexin-V—FITC检测细胞凋亡率。结果与转染Flag-Notch3(WT)组相比,过表达Flag—Notch3(R90C)下调细胞内源性Beclin1蛋白的表达,LC3Ⅱ/LC3I的比值降低。与转染Flag—Notch3(WT)组相比,过表达Flag—Notch3(R90C)诱导A10细胞自噬空泡聚集减少。与转染Flag—Notch3(WT)组相比,过表达Flag—Notch3(Rgoc)使A10细胞凋亡率增加。结论Notch3(R90C)突变蛋白可通过抑制细胞巨自噬水平诱导血管平滑肌细胞凋亡。
关键词:notch 大鼠主动脉血管平滑肌细胞 自噬 凋亡
单位:河南省人民医院肾病风湿科郑州450003 郑州大学第一附属医院神经内科郑州450052 河南省人民医院神经内科郑州450003
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