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携带肝细胞生长因子的腺病毒感染脐带间充质干细胞的实验研究

张玉镇 娄季宇 杨霄鹏 曾志磊 王珊珊 刘新珊 张晓明 尹红蕾 王运良 中国实用神经疾病 2015年第13期

摘要:目的 通过检测感染携带肝细胞生长因子(HGF)腺病毒的脐带间充质干细胞(hUC-MSC)内酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运体(DAT)和多巴胺(DA)的表达水平及动态变化,探讨hUC-MSC在HGF过表达的情况下是否能向多巴胺能神经元分化,为HGF基因修饰hUC-MSC治疗帕金森病提供细胞基础。方法 采用组织块法分离培养hUC-MSC,流式细胞仪检测细胞是否表达间充质干细胞分子表面标志CD29、CD44和CD105;不同感染复数(0、50、100、150、200、400)的携带绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP)感染hUC-MSC后,流式细胞仪检测感染效率,并确定最佳感染复数;运用携带HGF的腺病毒感染hUC-MSC后,细胞免疫酶化学方法检测TH和DAT的表达情况。结果 采用组织块法可从脐带中成功分离出(表达间充质干细胞分子表面标志CD29、CD44和CD105)hUC-MSC;Ad-GFP可高效感染hUC-MSC,随着感染复数的升高,感染效率可达99.99%;感染携带HGF的腺病毒(Ad-HGF)后,hUC-MSC可逐渐表达TH和DAT,同时细胞形态也逐渐由纺锤状向多角形和不规则样转变。结论 腺病毒可高效感染hUC-MSC;感染Ad-HGF后,hUC-MSC可逐渐向多巴胺能样神经元分化。

关键词:帕金森病肝细胞生长因子脐带间充质干细胞分化

单位:郑州大学第二附属医院神经内科 郑州450014 解放军第一四八中心医院神经内科 淄博255300 解放军第一五九中心医院神经内科 驻马店463000

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

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