摘要：目的构建针对肿瘤凋亡基因FasL的小干扰RNA（siRNA）表达质粒，研究RNA干扰技术对人肺腺癌A549细胞FasLmRNA表达的抑制作用，探索Fas／FasI途径在肺癌转移中的作用机制。方法依据siRNA靶序列的设计原则，以FasLmRNA为靶基因，合成2对编码短发夹结构的两条DNA序列，经退火合成DNA双链，再克隆至siRNA表达质粒pSilencer2．0中，转化后进行PCR鉴定和DNA序列测定。用脂质体介导转染入人肺腺癌A549细胞株，采用实时荧光定量PCR检测细胞FasL mRNA水平的变化。结果成功构建发卡样FasLsiRNA真核表达载体，转染人肺腺癌A549细胞后，FasLmRNA的表达水平显著下降。结论成功构建的FasL基因siRNA真核表达载体pSi2．0-FasL能显著抑制人肺腺癌A549细胞FasLmRNA的表达。

关键词：fasl基因 rna干扰 表达载体 实时荧光定量pcr 

单位：郑州大学第一附属医院呼吸内科 450052