摘要:目的应用一步法Real-timeRT—PCR检测不同载体转染HepG2细胞沉默人类白细胞抗原一E(HLA—E)基因的效率。方法分别用Gal—PEG—PEI/psiRNA、Gal—PEG—PEI/NC—psiRNA、PEG—PEI/psiRNA、Lipofectamine2000/psiRNA、裸psiRNA转染HepG2细胞,提取细胞总RNA,一步法Real—timeRT—PCR检测HLA—E基因沉默前后mRNA表达水平。结果Gal—PEG—PEI组对HLA—E基因的沉默效率为55%,显著高于PEG—PEI组、Lipofectamine2000组、裸psiRNA组和阴性对照组(P〈0.01)。Gal—PEG~PEI组的沉默作用可持续7d。结论经一步法Real—timeRT—PCR检测,Gal—PEG—PEI/psiRNA纳米粒对HepG2细胞HLA—E基因有较高的沉默效率。
关键词:rna干扰
单位:河南省肿瘤医院肝胆胰外科 郑州450008 中山大学附属第三医院肝移植中心
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