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抗人CTGF单链抗体噬菌体展示文库的构建

王朝阳 任学群 刘瑞敏 姬新颖 马远方 中国实用医刊 2013年第11期

摘要:目的构建抗人结缔组织生长因子(CTGF)单链抗体(scFv)噬菌体展示文库。方法用重组人CTGF(rhCTGF)免疫balb/c小鼠,表达CTGF抗体后取小鼠脾脏获得B细胞,提取总RNA后反转录为cDNA,聚合酶链反应(PCR)获取重链可变区(vh)和轻链可变区(v1),vh和vl再次PCR装配为vl—linker.vh即scFv基因片段,并与噬菌粒PAKl00酶连接,形成含有抗结缔组织生长因子单链抗体基因的目的噬菌粒;电转化入大肠杆菌XLl-blue,加入辅助噬菌体扩增后,建立噬菌体展示库重组库。结果经过凝胶电泳及噬菌粒基因测序分析,证实成功构建了抗结缔组织生长因子单链抗体定向免疫库。结论成功的构建了抗结缔组织生长因子单链抗体库,为制备抗结缔组织生长因子单链抗体奠定基础。

关键词:结缔组织生长因子噬茵体展示噬菌体展示文库抗结缔组织生长因子单链抗体

单位:河南大学淮河医院 开封475000 河南大学医学院天然药物与免疫重点实验室

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