摘要:目的建立人宫颈上皮的永生化细胞系,并进行生物学特性进行鉴定.方法用含人乳头状瘤病毒(HPV)16型E6、E7基因的腺病毒伴随病毒感染人胎儿宫颈上皮细胞,培养、传代.采用激光共聚焦免疫荧光和PCR技术检测HPV16型E6、E7基因的表达情况;取20代细胞,采用软琼脂培养、染色体核型分析和Scid小鼠皮下接种等方法检测细胞系的生物学特性;采用电子显微镜观察细胞的形态.结果 20代细胞的表型仍保留原代上皮细胞的特征,表现为单层生长和锚锭依赖性生长.激光共聚焦免疫荧光和PCR技术检测显示,细胞内有HPV16型E6、E7基因的表达,其基因片断长度为829 bp.20代细胞进行软琼脂培养不形成克隆; scid小鼠皮下接种未成瘤;染色体核型分析为二倍体和多倍体,11号染色体可能为HPV16型E6、E7基因整合的部位.电子显微镜观察可见张力原纤维,证实细胞为鳞状上皮来源.结论成功建立了HPV16型E6、E7基因诱导的宫颈上皮永生化细胞系,且其生物学特性稳定,可进一步用以宫颈癌病因和发病相关机制的研究.
关键词:子宫颈 上皮细胞 细胞系 病毒性 癌基因蛋白质类
单位:100034; 北京大学第一医院妇产科; 中国疾病预防控制中心病毒病研究所肿瘤室
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