摘要：目的纯化卵巢上皮性癌单克隆抗体(单抗)183B2相关抗原,并对该抗原及其理化特性进行鉴定和分析。方法用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法筛选出与单抗183B2阳性反应较强的卵巢上皮性癌腹水标本,继而用免疫亲和层析技术纯化得到相应抗原。纯化后的抗原分别经高碘酸钠、神经氨酸酶、去糖脂混合液及胰蛋白酶、链酶蛋白酶破坏糖链和肽链后,用间接ELISA方法检测其活性,并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白印迹(western blot)法进行鉴定。再进一步用双向电泳结合western blot对卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞的相应抗原进行验证。结果纯化后的抗原经破坏糖链处理后活性不变,而经破坏肽链及加热处理后活性消失。SDS-PAGE显示,该抗原两个不同亚单位的相对分子质量分别为56000和25000,而前者能与单抗183B2反应。纯化后的抗原N端氨基酸测序后进行同源序列分析发现,此序列与人Ig重链N端的15个氨基酸相同。确定了双向电泳凝胶上3个目标点的位置,并初步确定该蛋白点的相对分子质量约为56000,等电点为5.3～5.8。结论卵巢上皮性癌单抗183B2相关抗原决定簇位于糖蛋白的肽链上,为Ig超家族成员,它可能是一种新的肿瘤相关抗原。

关键词：卵巢肿瘤 抗体 单克隆 抗原 

单位：北京大学人民医院妇科肿瘤中心