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卵巢上皮性癌6B11抗独特型微抗体疫苗免疫方案的探讨

祝洪澜; 李艺; 昌晓红; 崔恒; 冯捷; 魏丽惠 中华妇产科 2006年第01期

摘要:目的探讨卵巢上皮性癌6811抗独特型微抗体(6811微抗体)的最佳免疫剂量和免疫间隔时间,为用于临床治疗卵巢上皮性癌打下基础。方法(1)采用基因工程方法构建6811微抗体的重组表达载体,并将其转化到大肠杆菌BL21中进行表达。直接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定其免疫学活性。(2)将BALB/c小鼠随机分为A、B、C、D、E、F组,于第1、14、28天时均分别给予6811微抗体150、100、50μg及小鼠IgG 100μg、人IgG 100μg、磷酸盐缓冲液100μl,其中A、B、C组为实验组,D、E、F组为对照组。间接ELISA法测定各组小鼠血清中抗卵巢上皮性癌6811抗独特型抗体(6811抗体)的抗体(即Ab3)的水平,并观察其变化规律。(3)将小鼠脾淋巴细胞作为效应细胞,人卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞作为靶细胞,设定效靶比为250:1、125:1、60:1、30:1,^51Cr释放实验检测各组小鼠脾淋巴细胞产生的抗体依赖的细胞毒效应(ADCC);设定血清稀释度为1:2、1:25、1:50,^51Cr释放实验检测各组小鼠脾淋巴细胞产生的补体依赖的细胞毒效应(CDC)。分别于紫外光波长490nm时测定其吸光度(A)值。结果(1)大肠杆菌B121中成功表达6811微抗体,并证实其保留了6811抗体的免疫学活性。(2)用上述不同剂量6811微抗体免疫BALB/c小鼠,在第14天注射后1周,血清中可检测到较低水平Ab3;第28天注射后1周,Ab3水平达到最高值,A、B、C组平均A值分别为1.16、1.11、1.06;此Ab3水平持续6周,6周内A、B、C组平均A值分别为1.05、1.06、0.94,B组略高于A、C两组,但3组间比较,差异无统计学意义(P〉0.05);第7周Ab3水平明显下降。此时,给予加强免疫,1周后Ab3水平很快升高,并持续至少2周。(3)在4个不同的效靶比条件下,实验组小鼠脾淋巴细胞诱导产生的ADCC明显高于对照组(P〈0.05�

关键词:卵巢肿瘤抗体抗独特型免疫接种加强

单位:北京大学人民医院妇科肿瘤中心; 100044

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