摘要：目的探讨小分子干扰RNA（siRNA）对宫颈癌细胞系HeLa细胞中人乳头状瘤病毒（HPV）18型E6、E7 mRNA表达的干扰作用。方法采用体外转录方法合成HPV18E6、E7 siRNA，用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定HeLa细胞活性[以吸光度（A）值表示]，筛选出最适宜转染浓度。通过阳离子脂质体将HPV18E6、E7 siRNA转染入靶细胞HeLa细胞中。实验分为3组，E6转染组（转染HPV18E6 siRNA），E7转染组（转染HPV18E7 siRNA），设未转染细胞为对照组。RT-PCR技术分别检测转染24、48、72h后HeLa细胞中HPV18E6、E7 mRNA的表达。流式细胞仪检测细胞周期。结果MTF比色法检测结果显示，HPV18E6、E7 siRNA的最适宜转染浓度为20pmol／L。以此浓度FIPV18E6、E7 siRNA转染后，E6转染组细胞活性为0．57±0．05，E7转染组细胞活性为0．62±0．04，分别与对照组的0．87±0．05比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。E6转染组转染前HPVl8E6mRNA表达水平为0．63±O．04，转染后24、48、72h，其表达水平分别为0．53±0．04、0．46±0．02、0．56±0．03；E7转染组转染前HPV18E7 mRNA的表达水平为0．66±0．03，转染后分别为0．60±0．05、0．52±0．04、0．59±0．02，E6、E7转染组各转染时间点分别与其转染前比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。E6转染组S期细胞比例最低为（0±5．5）％，G2期细胞最高为（66．9±3．5）％；E7转染组S期细胞比例最低为（5．6±4．2）％，G2期细胞最高为（47．2±0．5）％，E6、E7转染组各细胞周期分别与对照组[S期细胞为（39．4±0．4）％，G2期细胞为（1．4±1．2）％]比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论宫颈癌HeLa细胞中存在RNA干扰现象，对外源性HPV18E6、E7 siRNA的干扰具有特异性。

关键词：rna 小分子干扰 癌基因蛋白质类 病毒性 宫颈肿瘤 

单位：青岛大学医学院附属医院妇产科; 266003; 青岛大学医学院微生物实验室; 266003