摘要：目的研究短发夹状RNA（shRNA）干扰对宫颈癌细胞中Pin1基因表达及细胞增殖和凋亡的影响。方法构建靶向Pin1基因的shRNA真核表达质粒pSIREN-Pin1，在脂质体介导下转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞（HeLa／p-shRNA组），同时以对照质粒pSIREN-Con（HeLa／p-Con组）和无血清培养基转染HeLa细胞（HeLa组）作为对照，分别应用RT-PCR技术及蛋白印迹法检测Pin1 mRNA及蛋白表达水平，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法和软琼脂细胞克隆实验检测细胞增殖状况，流式细胞仪分析细胞凋亡情况。结果转染后48h，HeLa／p-shRNA组Pin1 mRNA及蛋白表达水平分别为0．19±0．05和0．33±0．14，HeLa／p-Con组分别为0．84±0．16和0．79±0．17，HeLa组分别为0．89±0．11和0．81±0．15，前组Pin1 mRNA及蛋白表达水平分别与后两组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；转染pSIREN—Pin1质粒后HeLa细胞中Pin1 mRNA及蛋白表达抑制率分别为77％和58％。MTT比色法检测显示，HeLa／p-shRNA组细胞增殖率明显下降（P〈0．05）。软琼脂克隆实验显示，HeLa／p-shRNA组细胞克隆小而稀疏，细胞克隆形成率为（12±3）％，明显低于HeLa／p-Con组的（20±5）％和HeLa组的（24±4）％（P〈0．05）。流式细胞仪分析显示，HeLa／p-shRNA组细胞凋亡率为（24．3±5．7）％，明显高于HeLa／p-Con组的（5．0±1．4）％和HeLa组的（1．8±0．4）％（P〈0．05）。结论shRNA干扰技术能有效抑制靶基因Pin1的表达，进而可抑制宫颈癌细胞增殖并诱导细胞凋亡增加，为宫颈癌的基因研究及治疗提供新思路。

关键词：基因表达 rna干扰 宫颈肿瘤 肽基脯氨酰异构酶 细胞凋亡 

单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心; 武汉430030