摘要：目的 了解外源性人乳头状瘤病毒16型（HPV16）E7基因对子宫颈癌细胞周期的影响.方法 从宫颈癌标本中经PCR扩增回收HPV16E7基因片段,将正确的E7基因片段插入到穿梭质粒pAdTrack-CMV中,与骨架质粒pAdEasy-1在大肠埃希菌Bj5183中同源重组,重组腺病毒质粒转染人胚肾细胞株HEK-293细胞,包装表达E7基因的腺病毒,然后转染HPV18阳性的宫颈癌细胞株HeLa细胞,四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测转染后HeLa细胞的增殖情况,以吸光度（A）值表示;流式细胞仪检测转染前后HeLa细胞的细胞周期和细胞周期蛋白D1表达的变化.结果 在HEK-293细胞中,可以收获高转染效率的腺病毒.在荧光显微镜下,可以观察到HEK-293细胞和HeLa细胞中均有绿色荧光蛋白的表达.提取HEK-293细胞RNA,RT-PCR技术可以检测到E7基因的表达.MTT比色法检测结果显示,转染后HeLa细胞的A值最低为0.38±0.02,最高为0.96±0.01,分别与转染前的0.27±0.03比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）.流式细胞仪检测结果显示,转染12 h后,S期细胞占（36.0±2.0）%,转染24 h后为（49.9±4.2）%,分别与转染前的（26.0±0.4）%比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;转染前、后细胞周期蛋白D1阳性表达率分别为22.4%、55.2%,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 携带HPV16 E7基因的腺病毒可转染子宫颈癌HeLa细胞,并在HeLa细胞内表达,HPV16E7基因的表达进一步影响HeLa细胞的细胞周期蛋白的表达,促进HeLa细胞增殖,可望用于治疗宫颈癌.

关键词：宫颈肿瘤 癌基因蛋白质类 病毒性 转染 hela细胞 

单位：青岛大学医学院附属医院妇产科; 266003; 青岛大学医学院附属医院微生物学教研室; 266003