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雌、孕激素通过激活磷酸化信号传导通路调控卵巢上皮性癌细胞nm23-H1蛋白的表达

华克勤; 尧良清; 曹琦; 黄妍; 赵宇清; 丰有吉 中华妇产科 2006年第11期

摘要:目的探讨雌、孕激素激活磷酸化信号传导通路后,对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞转移抑制基因nm23-H1蛋白表达的影响。方法采用不同浓度的17β雌二醇(雌激素组)及醋酸甲羟孕酮(孕激素组)分别作用于卵巢透明细胞癌细胞株ES-2细胞,以二甲基亚砜作为对照(对照组)。采用划痕实验观察各组细胞迁移能力的变化;采用穿膜小室(Transwell小室)体外侵袭实验观察各组细胞侵袭能力的变化;采用蛋白印迹法检测各组细胞nm23-H1蛋白表达及蛋白激酶β(AKT)蛋白、磷酸化蛋白激酶β(pAKT)蛋白表达的变化及其与时间、剂量的相关性;采用RNA干扰技术观察转染AKT小分子干扰RNA(siRNA)质粒后,各组细胞nm23-H1蛋白表达的变化及其侵袭能力的变化。结果划痕实验24h时,各组ES-2细胞均向划痕处弥合,划痕间距雌激素组为(1.39±0.08)mm,孕激素组为(1.96±0,07)mm,对照组为(1.65±0.12)mm;雌激素组明显小于对照组(P=0.029),而孕激素组明显大于对照组(P=0,014)。Transwell小室培养12h时,穿过微孔膜的细胞雌激素组为(119±13)个,孕激素组为(78±8)个,对照组为(92±16)个;雌激素组明显多于对照组(P=0.015),而孕激素组明显少于对照组(P=0.006)。蛋白印迹法检测结果显示,17β雌二醇降低ES-2细胞nm23-H1蛋白表达的作用与剂量和时间呈明显负相关关系(P=0.020,P=0.001),醋酸甲羟孕酮增加ES-2细胞nm23-H1蛋白表达的作用与剂量和时间呈明显正相关关系(P:0.003,P=0,002);17β雌二醇增加ES-2细胞pAKT蛋白表达的作用与剂量和时间呈明显正相关关系(P=0.001,P=0.007),醋酸甲羟孕酮降低ES-2细胞pAKT蛋白表达的作用与剂量和时间呈明显负相关关系(P:0.012,P=0.039);而17p雌二醇和醋酸甲羟孕酮对ES-2细胞AKT蛋白的表达均无明显影

关键词:卵巢肿瘤腺癌透明细胞雌激素类孕激素类

单位:复旦大学附属妇产科医院妇科; 上海200011

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