摘要：目的探讨X染色体相关凋亡抑制蛋白（XIAP）的小分子干扰RNA对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞系SKOV3细胞生长的影响。方法设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链，克隆至pSUPER质粒。转化大肠埃希菌DH5α菌株，构建重组质粒pSUPER-siXIAP，对其进行双酶切和DNA序列分析鉴定。间接免疫荧光染色法鉴定SKOV3细胞XIAP蛋白的表达。实验分为4组：分别用重组质粒pSUPER-siXIAP（pSUPER-siXlAP组）及阴性无关序列重组对照质粒pSUPER-nsRNA（pSUPER-nsRNA组）及空载体质粒pSUPER（pSUPER组）转染SKOV3细胞，以未转染质粒的SKOV3细胞为空白对照组。RT-PCR技术检测各组细胞XIAPmRNA的表达，蛋白印迹法检测各组细胞XIAP蛋白的表达，流式细胞仪分析各组细胞细胞周期的变化，四甲基偶氮唑蓝（MTr）比色法观察各组细胞生长的变化。结果本实验成功构建了XIAP特异性的RNA干扰载体pSUPER-siXIAP质粒。间接免疫荧光染色法检测证实SKOV3细胞中存在XIAP蛋白的过度表达。转染后72h，SKOV3细胞XIAP蛋白表达水平降低，空白对照组、pSUPER组、pSUPER-nsRNA组及pSUPER-siXIAP组的相对密度值分别为3584±124、2138±65、1973±80和110±12，各组间比较，差异有统计学意义（P=0．0334）；转染后72h，SKOV3细胞XIAPmRNA表达水平明显下降，空白对照组、pSUPER组、pSUPER-nsRNA组及pSUPER-siXIAP组各组的相对密度值分别为6674±274、4532±107、2322＋57和1864±78，各组间比较，差异有统计学意义（P=0．0127）。流式细胞仪检测结果显示，pSUPER-siXIAP组G，期细胞较空白对照组、pSUPER组明显增加（P〈0．05）；pSUPER-siXIAP组S期细胞较空白对照组、pSUPER组明显减少（P〈0．05）。MTr比色法检测结果显示，pSUPER-siXIAP组细胞生长增殖被抑制，生长速度较空白对照组细胞明显减慢（P=0．0237）；pSUPER-nsRNA组和pSUPER组细胞生长速度较空白对照组细胞也明显减慢�

关键词：卵巢肿瘤 bna 小分子干扰 x连锁凋亡抑制蛋白 

单位：第四军医大学西京医院妇产科; 西安710033