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电压门控钾离子通道对卵巢黄素化颗粒细胞增殖、分泌及凋亡的影响

赵志明 崔娜 徐素欣 高福禄 郝桂敏 曹金凤 中华妇产科 2008年第12期

摘要:目的探讨电压门控钾离子通道(Kv)对人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导的卵巢黄素化颗粒细胞增殖、分泌及凋亡的影响。方法收集2007年11月至2008年2月行体外受精。胚胎移植患者的卵泡液共25份,密度梯度法获得卵巢黄素化颗粒细胞,采用RT—PCR技术检测颗粒细胞中Kv mRNA的表达。将培养贴壁后的颗粒细胞按干预方式分为空白组、4氨基吡啶(4-AP)组、hCG组和hCG+4-AP组共4组,hCG和4-AP的终浓度分别为1250U/L、5nmol/L。培养24h后,采用化学发光法测定各组孕酮水平;采用流式细胞仪和分光光度法检测各组颗粒细胞的凋亡情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组颗粒细胞的增殖、抑制情况。结果(1)培养24h后,空白组、4-AP组、hCG组和bCG+4-AP组颗粒细胞中的孕酮水平分别为(547±64)、(206±32)、(1991±172)和(763±79)nmol/L。4-AP组、hCG组分别与空白组比较,差异均有统计学意义(P〈0.01);hCG+4-AP组与hCG组比较,差异也有统计学意义(P〈0.01)。(2)培养24h后,4-AP组颗粒细胞抑制率为19.7%,与空白组(0)比较,差异有统计学意义(P〈0.05);hCG+4-AP组为34.6%,与hCG组(0)比较,差异也有统计学意义(P〈0.01)。4-AP组、hCG+4-AP组的颗粒细胞增殖率分别为80.3%、68.2%,分别与空白组(100%)比较,差异均有统计学意义(P〈0.05、P〈0.01);hCG组(100.4%)高于空白组,但差异无统计学意义(P〉0.05)。(3)培养24h后颗粒细胞的凋亡率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)活性,4-AP组分别为(40±5)%和0.049±0.009,均高于空白组[(17±4)%和0.029±0.008],hCG+4-AP组[(25±4)%和0.039±0.008]也均高于hCG组[(15±3)%和0.022±0.007],差异均有统计学意义(P〈0.01)。结论4-AP能够抑制卵巢黄素化颗粒细胞

关键词:粒层细胞钾通道电压门控孕酮细胞凋亡

单位:河北医科大学第二医院生殖医学科 石家庄050000 河北医科大学第二医院组织与胚胎学教研室 石家庄050000

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