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一氧化氮与HPV感染的关系及其对子宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响

魏雪敏 汪清 高蜀君 隋龙 中华妇产科 2011年第04期

摘要:目的 探讨一氧化氮(NO)与HPV感染的关系及其对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响.方法 选择2009年12月1日至2010年8月5日在复旦大学附属妇产科医院宫颈疾病诊疗中心行阴道镜检查的患者115例,应用HPV分型检测试剂盒(可检测21种HPV亚型)进行HPV分型,同时应用Griss法间接检测宫颈局部NO含量.在体外培养的宫颈腺癌细胞株HeLa细胞和宫颈鳞癌细胞株Caski细胞中,加入不同浓度(终浓度分别为0.125、0.25、0.5 、1.0及2.0 mmol/L)NO供体--硝普钠(SNP)后培养24 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并应用荧光定量逆转录PCR技术及蛋白印迹法检测SNP处理后细胞中HPVE6、E7 mRNA的表达及p53蛋白的表达.结果 (1)115例患者中,宫颈HPV感染93例,其中高危型50例,低危型43例;无HPV感染22例.115例患者的宫颈局部均检测到NO,其中高危型HPV感染患者的宫颈局部NO含量为(47.6±1.4)μmol/L,低危型HPV感染者为(24.1±1.2)μmol/L,无HPV感染者为(22.8±0.3)μmol/L,高危型HPV感染者高于低危型HPV感染者和无HPV感染者,差异有统计学意义(P<0.05);而低危型HPV感染者与无HPV感染者比较,差异无统计学意义(P>0.05).(2)不同浓度(0.125、0.25、0.5 1.0及2.0 mmol/L)SNP处理HeLa、Caski细胞24 h后,能抑制细胞生长、促进细胞凋亡,当SNP浓度≥1.0 mmol/L时,与SNP处理前比较,差异均有统计学意义(P<0.05).1.0 mmol/L的SNP处理24h后,HeLa细胞中HPV18 F6、E7 mRNA的表达水平(分别为19.181±0.360、17.571±0.010)明显低于SNP处理前(分别为27.362±0.191、22.962±0.053;P<0.05),p53蛋白的表达水平(1.17±0.03)明显高于SNP处理前(0.23±0.05;P<0.05);但Caski细胞中HPV16E6、E7mRNA和P53蛋白的表达在SNP处理前、后无明显变化(P>0.05).结论 宫颈局部微环境中NO含量增加与感染高危型HPV有一定的相关性;SNP能�

关键词:宫颈肿瘤一氧化氮细胞增殖细胞凋亡乳头状瘤病毒感染

单位:复旦大学附属妇产科医院宫颈疾病诊疗中心 上海200011

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