摘要：目的Podocin是构成肾小球足细胞裂孔隔膜（slit diaphragm，SD）完整性的重要分子，其表达异常与大量蛋白尿的形成有关。本研究采用体外培养肾小球足细胞系，探讨足细胞损伤过程中，podocin mRNA表达和分布变化与足细胞损伤的关系。方法将体外培养的足细胞采用随机数字表法设立为实验组与对照组。实验组采用嘌呤霉素（puromycin aminonucleoside，PAN）刺激（剂量为50μg／mL），分别于8h，24h和48h观察细胞形态、提取总RNA和细胞免疫组化观察podocin的分布。对照组用含10％FBS的RPMI 1640培养液培养。细胞图像应用Image J图像处理软件，计算实验组与对照组在上述各时间点200倍镜下随机选择的30个细胞的相对面积，半定量RT—PCR和间接免疫荧光法检测podocin mRNA表达和分布变化。结果对照组呈星形伸出树枝状突起，相邻细胞间形成相互连接。实验组细胞体缩小，足突回缩、消失，细胞间失去相互连接。上述各时间点两组间podocin mRNA表达比较，差异无显著意义（P〉0．05）。Podocin在对照组呈细丝状均匀分布于细胞核膜、细胞质及细胞膜；在实验组主要沿细胞核膜呈点线样分布，刺激后8h和24h细胞质有少许分布，刺激48h后出现细胞膜、细胞质分布缺失。结论Podocin分布异常与足细胞损伤密切相关，损伤早期即有变化；podocin分布异常是足细胞损伤过程中的重要分子效应。

关键词：足细胞系 podocin 嘌呤霉素 

单位：广州医学院附属广州市第一人民医院儿科 广州510180