摘要：目的探讨bcl-2表达上调对人小细胞肺癌（SCLC）多药耐药的影响及相关机制。方法通过定向克隆方法，构建bcl-2正义RNA真核表达载体pLXSN-bcl-2；同时，体外合成bcl-2反义硫代磷酸寡核苷酸（AS—PS—ODNs），然后采用脂质体分别将其转染至人SCLCH446细胞及H446／DDP细胞，用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot方法检测转染细胞中bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平；流式细胞仪DNA倍性分析观察顺铂（DDP）诱导转染细胞凋亡情况。转染时细胞分3组，pLXSN-bcl-2转染组[或bcl-2 AS—PS—ODNs转染组（AS-PS-ODNs转染组）]、pLXSN转染组[或bcl-2无义硫代磷酸寡核苷酸转染组（NS—PS—ODNs转染组）]和对照组（H446细胞组、H446／DDP细胞组）。结果（1）Western blot检测结果表明，对照H446细胞组、pLXSN转染组、pLXSN-bcl-2转染组间Bcl-2蛋白表达水平差异有统计学意义（F=11221，P〈0．05）。转染pLXSN-bcl-2的H446细胞强表达Bcl-2蛋白（灰度值0．854±0．016），与对照H446细胞组（灰度值为0．103±0．005）相比差异有统计学意义（t=2．45，P〈0．01）；NS—PS—ODNs转染组的H446／DDP细胞，AS—PS—ODNs转染组的H446／DDP细胞。对照H446／DDP细胞组间Bcl-2蛋白表达水平差异有统计学意义（F=11028，P〈0．01）。转染bcl-2AS—PS—ODNs的H446／DDP细胞表达Bcl-2蛋白水平（灰度值为0．695±0．014）。与对照H446／DDP细胞组（灰度值为0．942±0．018）相比，显著下降（t=2．26，P〈0．01），但仍高于亲代H446细胞Bcl-2表达水平（t=2．31，P〈0．01）。（2）流式细胞仪DNA倍性分析结果显示，转染pLXSN-bcl-2的H446细胞，经5μg／ml DDP诱导后凋亡率为（20．9±0．2）％，明显低于对照H446细胞组的（31．1±0．21）％。差异有统计学意义（t=2．45，P〈0．01）；5μg／ml DDP诱导转染AS—PS—ODNs的H446／DDP细胞的凋亡率为（31．5±0．4）％，对照H446�

关键词：癌 小细胞 细胞系 h446 多药耐药细胞系 

单位：第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所; 重庆400037