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应用分子伴侣共表达系统表达结核分枝杆菌编码蛋白

黄海荣 董旭 张宗德 赵雁林 姜广路 李强 中国防痨 2009年第02期

摘要:目的 研究共同表达分子伴侣能否提高结核分枝杆菌编码基因的表达效率及被表达蛋白的生物活性。方法 将携带有结核分枝杆菌编码基因的表达质粒Rv3790::pET16b、Rv3791::pET16b与能够同时表达3个分子伴侣DnaK、DnaJ和GrpE的质粒pkJE7共同在大肠埃希菌BL21(DE3)表达,之后对所获得的蛋白通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印记分析(Western Blot)检测蛋白产量,并分析蛋白的活性。以Rv3790::pET16b、Rv3791::pET16b单独在BL21(DE3)内的表达作为对照。结果 与分子伴侣共表达的结核分枝杆菌编码基因相对于目的基因单独表达时获得较多的可溶性蛋白,较少的包涵体和蛋白降解;共表达的蛋白也具有相对较好的活性。结论共同表达分子伴侣能够提高某些结核分枝杆菌编码蛋白的表达效率和生物活性。

关键词:蛋白表达分子伴侣共同表达

单位:北京市结核病胸部肿瘤研究所 北京101149 大连医科大学生化教研室 大连116027

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