摘要:目的建立抗结核新药细胞毒性筛选的MTT法并应用于氯苯吩嗪衍生物IC50的测定,为新药筛选提供参数和依据。方法取Vero和HepG2细胞,用培养液制成不同浓度的细胞悬液,96孔培养板中培养2~4 h后加入MTT作用4 h,弃去培养液,加入DMSO溶解其甲臜颗粒,在405 nm,450 nm,492 nm和630 nm波长处测定OD值,根据不同波长所测OD值的大小确定其最佳检测波长。根据细胞浓度与OD值关系曲线确定其最适细胞浓度。取最适浓度细胞接种入96孔培养板,与经3倍系列稀释的不同浓度的化合物作用48 h后测定其OD值,计算化合物对Vero和HepG2细胞的相对抑制率,用origin7.0软件拟合量效曲线,计算各化合物的IC50。结果MTT的最佳检测波长为492 nm,最适细胞接种浓度为2.5×10^4~4×10^5个/ml。所测定的131个氯苯吩嗪衍生物对Vero和HepG2细胞的IC50结果相似;其中有10个化合物的IC50大于其最高试验浓度,提示其细胞毒性较小。结论采用MTT法检测化合物对Vero细胞的增殖反应,可经济、快速地对抗结核新药的细胞毒性进行初步筛选。
关键词:抗结核药 药物评价 临床前 毒性试验 四唑鎓盐类
单位:北京市结核病胸部肿瘤研究所 北京101149
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社
相关期刊
中国CT和MRI Journal of Systems Science and Complexity Petroleum Science International Journal of Automation Computing International Journal of Automation Computing Communications in Theoretical Physics Journal of Systems Engineering and Electronics Research in Astronomy and Astrophysics The Journal of China Universities of Posts and Telecommunications China Petroleum Processing Petrochemical Technology