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应用多重PCR方法快速鉴定结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌的研究

王桂荣 付育红 梁倩 尚媛媛 姜广路 赵立平 于霞 陈素婷 黄海荣 中国防痨 2013年第09期

摘要:目的建立并评估快速鉴定结核分枝杆菌复合群(MTBC)与非结核分枝杆菌(NTM)的多重PCR方法。方法应用分别针对MTBc的oxyR-ahpC基因间隔区、MTBC和NTM的rpoB基因可变区的3对分枝杆菌特异性引物进行多重PCR扩增,扩增产物分别为473bp、235bp和136bp。应用该多重PCR方法对6株MTBC标准株、50株NTM标准株、312株MTBC临床分离株和300株NTM临床分离株进行了初步菌种鉴定。结果经多重PCR扩增后进行凝胶电泳,MTBC标准株473bp和235bp片段均可见,NTM标准株仅见136bp片段。312株MTBC临床分离株中,310株扩增出473bp和235bp片段,敏感度为99.36%(310/312),特异度为99.32%(294/296);300株NTM临床分离株中,294株扩增出136bp片段,敏感度为98.00%(294/300),特异度为100.00%(310/310)。结论该多重PCR方法可检测并鉴别MTBC及NTM,具有高度的特异度和敏感度,有可能作为鉴别MTBC与NTM的有价值的检测手段。

关键词:分枝杆菌结核分枝杆菌属多重聚合酶链反应

单位:首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所国家结核病临床实验室 101149

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