摘要:目的建立由卡介苗接种所引发的淋巴结炎致病菌分离与菌型鉴定的豚鼠模型,研究卡介苗临床不良反应病原学的鉴定方法。方法按照随机数字表法将39只豚鼠分为生理盐水组(3只),高剂量和低剂量卡介苗接种组(各18只)。分别于注射生理盐水和卡介苗后4、5、8周对豚鼠进行解剖,手术摘取卡介苗接种后豚鼠的淋巴结与局部脓肿,研磨处理为组织悬液。将组织悬液接种于改良罗氏培养基、7H11培养基、7H9液体培养基进行培养,同时对组织悬液进行抗酸染色与卡介菌特异性缺失区1(BCGRD1)的检测。培养结束后对3种培养物均进行抗酸染色与BCGRD1的检测。结果组织悬液在改良罗氏培养基上培养阳性结果为淋巴结33/33,脓肿6/6;在7Hll培养基上培养阳性结果为淋巴结33/33,脓肿6/6;在7H9液体培养基阳性结果为淋巴结22/33,脓肿6/6。培养物抗酸染色结果呈阳性,细菌形态与特性与卡介菌一致;培养物BCGRDl的检测结果与卡介苗DNA国家参考品及皮内注射用卡介苗特异性鉴别试验用国家参考品的扩增结果一致(196bp)。结论卡介苗接种导致的淋巴结炎的相关标本可以通过固体培养法培养出致病菌,对培养物进行BCGRDl的检测可以鉴定菌型。卡介苗高剂量免疫、选取肿大淋巴结作为检查样本和固体培养基培养法更有利于模型的建立。
关键词:卡介苗 免疫 淋巴结炎 基因缺失 诊断
单位:温州医科大学环境安全与健康风险评估研究院 325000 中国食品药品检定研究院结核病疫苗室
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