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半乳糖凝集素-1对结核分枝杆菌感染巨噬细胞的调节作用及其临床价值

刘海鹏; 王鹏; 杨华; 郑瑞娟; 陈建霞 中国防痨 2016年第06期

摘要:目的分析半乳糖凝集素-1(galectin-1,Gal1)对结核分枝杆菌(MTB)感染巨噬细胞的调节作用,并探讨其血清含量与结核病的临床相关性。方法选取2014年612月于同济大学附属上海市肺科医院门诊就诊的活动性结核病患者40例作为病例组;选取同时期结核菌素皮肤试验(tuberculinskintest,TST)阳性潜伏感染者20例作为观察组;参照观察组患者的年龄和性别构成,按照1:1的比例,选择同期体检TST阴性健康者20名作为对照组。研究对象各采集外周血5ml,采用El。ISA检测其血清Gal-1含量;分别采用蛋白质免疫印迹(Westernblot)和ELISA检测MTB感染人单核巨噬细胞(THP1)后,Gal-1的表达及分泌情况;应用流式细胞术检测外源性Gal1(设置添加10、50ng/ml的GaLl组和空白对照组)对人单核巨噬细胞(THP1)吞噬表达绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)的MTB(MTB-GFP)的影响;应用胞内存活实验检测外源性Gal—l对巨噬细胞清除MTB能力的作用。结果血清Gal-1含量病例组为(28.30±1.17)ng/ml,高于对照组的(21.28±1.74)ng/ml和观察组的(22.06±1.25)ng/ml,差异有统计学意义(F=5.50,P=0.006)。MTB感染THP一1细胞2h后,Gal1表达量增加。感染复数(multiplicityofinfection,MOI)值为1和5时,细胞培养液上清液中Gal-1含量分别为(391.27±34.45)pg/ml和(751.54±148.93)pg/ml。添加10、50ng/ml Gal-1组与空白对照组MTB-GFP阳性THP-1细胞的比率分别为(6.77±0.58)%、(6.93±0.62)%和(7.64±0.74)%,三组比较差异无统计学意义(F=1.53,P=0.291);MTDGFP阳性THP-I细胞的平均荧光强度分别为321.67±5.03、318.00±13.89、342.67±13.65,三组比较差异无统计学意义(F=3.94,p=0.081)。感染24h后,添加10ng/ml和50ng/mlGal-1组胞内克隆形成单位数[M(Q1~Q3)]分别为3250(

关键词:结核分枝杆菌半乳糖凝集素1巨噬细胞

单位:同济大学附属上海市肺科医院临床医学转化中心; 200433; 同济大学附属上海市肺科医院结核病临床中心; 200433; 上海市结核病肺重点实验室

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