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应用PCR-反向点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐药突变基因

彭亦平; 宗佩兰; 辛茶香; 熊国亮; 胡群芳; 袁小兰; 史安良; 姚琳; 王小路; 万赞燕; 吴娟 中国防痨 2016年第08期

摘要:目的 评价PCR-反向点杂交技术在检测结核分枝杆菌耐药突变基因中的应用价值。方法选取2014年8月至2015年12月江西省胸科医院住院的部分肺结核患者作为研究对象,共1071例。研究对象均送检了痰液标本,共1071份。所有患者均经病原学或病理学证实,或符合菌阴肺结核诊断标准。采用PCR-反向点杂交技术对研究对象痰标本进行异烟肼(H)、利福平(R)、链霉素(s)、乙胺丁醇(E)耐药基因检测,并以痰培养阳性标本的药物敏感性试验(简称“药敏试验”)检测结果作为金标准,来验证检测结果的可靠性及评价其检测效能。结果PCR-反向点杂交检测的1071例患者中,596例结核分枝杆菌阳性,阳性率为55.65%。其中,218例(36.58%)检出H、R、S、E耐药基因突变,分布于所测13个位点。H、R、S、E最常见突变位点分别位于KatG的315M(82.53%,137/166)、rpoB的$531L(69.50%,98/141)、rpsl的43M(78.65%,70/89)、embB的306M2(55.13%,43/78)和306M1(39.74%,31/78)。433例患者标本同时行结核分枝杆菌培养,培养阳性且同时PCR反向点杂交检测阳性157例。以培养及药敏试验结果为金标准,PCR-反向点杂交法对H、R、S、E的耐药检测经Kappa检验具有较好的一致性(Kappa值分别为0.77、0.73、0.66、0.49);敏感度分别为88.89%(40/45)、79.66%(47/59)、67.57%(25/37)、63.16%(12/19);特异度分别为91.07%(102/112)、91.84%(90/98)、95.00%(114/120)、91.30%(126/138)。结论PCR-反向点杂交技术用于结核分枝杆菌耐药基因检测较为可靠,对早期临床用药具有较好的指导作用。

关键词:聚合酶链反应分枝杆菌结核抗药性细菌

单位:江西省胸科医院内三科; 南昌330006; 江西省胸科医院内一科; 江西省胸科医院检验科; 江西省胸科医院科教科

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