摘要：目的探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法.方法通过酶消化法分离人皮肤外分泌汗腺,在外分泌汗腺生长的同时,成纤维细胞也在生长;用质量分数为0.25%的胰酶和0.02%的乙二胺四乙酸(EDTA)消化分离汗腺细胞和成纤维细胞;以Dulbecco改良的Eagle培养液(DMEM)为基础培养基,添加胎牛血清(体积分数10%)、青霉素(100 kU/L)和链霉素(100 mg/L),置37 ℃、体积分数为5%CO2、95%空气、饱和湿度条件下培养.倒置相差显微镜和苏木素-伊红染色,观察成纤维细胞形态,并对培养细胞行波形蛋白免疫组化及染色体鉴定.结果分离的成纤维细胞可在体外快速贴壁生长、增殖,波形蛋白免疫组化染色为阳性,染色体分析为46条.结论该方法所获得的皮肤成纤维细胞可在体外稳定培养,为在细胞水平上研究伤口愈合的机制提供了充足、可靠的靶细胞.

关键词：皮肤 成纤维细胞 细胞培养 免疫组化 染色体 

单位：100037; 北京; 解放军总医院三○四临床部全军创伤修复重点实验室; 442000; 十堰; 湖北省郧阳医学院附属太和医院; 100037; 北京; 解放军总医院三○四临床部全军创伤修复重点实验室