摘要:目的 探讨体外气液界面培养气道上皮在低渗液条件下黏液分泌与水通道蛋白-5(AQP5)表达间的关系,以进一步阐明渗透浓度、AQP5在慢性气道黏液高分泌过程中的地位和作用。方法利用体外气液界面细胞培养模型,进行兔气道上皮细胞原代培养。培养1周后,培养液渗透浓度换为235mmol/L(实验A组)、255mmol/L(实验B组)、270mmol/L(实验C组)和282mmol/L(对照组)。培养12h后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测各组AQP5mRNA表达,采用蛋白质免疫印迹法检测上清液中黏蛋白5AC(MUC5AC)分泌量。结果 倒置显微镜下各培养组细胞成多层生长。各实验组中MUC5AC分泌量均高于对照组(P〈0.001),其中以实验A组为最高;而AQP5 mRNA均明显低于对照组(P〈0.001),以实验A组为最低;实验组AQP5mRNA表达与MUC5AC呈显著负相关(r=-0.77,P〈0.001)。结论 在气液界面细胞培养模型中,低渗液条件下MUC5AC分泌量显著增加,较好地模拟了慢性气道炎症黏液高分泌的体内环境;AQP5mRNA表达与MUC5AC呈显著负相关。低渗环境以及由此引起的AQP5mRNA表达可能参与慢性阻塞性肺疾病黏液高分泌的形成过程。
关键词:水通道蛋白 黏蛋白 气液界面 低渗液
单位:重庆市急救医疗中心呼吸科; 400014; 重庆医科大学附属第二临床学院呼吸科; 400010
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