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血红素加氧酶-1对大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡及水通道蛋白-1表达的影响

王宇辉 陈淼 吴艳 钱明江 刘海霞 刘国跃 中华危重病急救医学 2013年第06期

摘要:目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化损伤大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡及水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响。方法取雄性sD大鼠肺组织,将分离、纯化的AECⅡ细胞原代培养24h后分为4组。正常组加入生理盐水;H2O2损伤组加入0.5mmol/LH2O2 处理;HO-1对照组加入1μmol/LHO-1处理;HO-1保护组同时加入1μmol/LHO-1及0.5mmol/LH2O2处理,将处理后的细胞继续培养2h。分别于处理前及处理后1、3、6、12h取细胞悬液,采用蛋白质免疫印迹试验(Westernblotting)检测AQP-1表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果H2O2损伤组AQP-1表达水平随时间延长逐渐下降,各时间点明显低于正常组;HO-1对照组和HO-1保护组AQP-1表达水平随时间延长呈上升趋势,各时间点高于其他各组,尤以HO-1保护组明显高于H2O2损伤组(1h:60.81±5.78比46.21±4.81,3h:63.05±9.61比39.32±4.96,6h:92.59±8.21比36.82±4.32,12h:86.16±14.84比34.88±2.66,均P〈0.05)。正常组和HO-1对照组细胞凋亡率无明显变化;H2O2损伤组细胞凋亡率随时间延长逐渐升高,各时间点均显著高于正常组;HO-1保护组细胞凋亡率于3h内逐渐升高,6h后下降并保持稳定,各时间点均显著低于H2O2 损伤组[1h:(9.04±2.17)%比(15.14±2.47)%,3h:(12.90±2.04)%比(22.37±4.84)%,6h:(10.42±1.68)%比(27.83±3.93)%,12h:(11.97±1.91)%比(33.63±6.61)%,均P〈0.05]。H2O2损伤组AQP-1与细胞凋亡率呈显著负相关(r=-0.723,P〈0.001),并存在回归关系[y=672.548(0.914)^x,R^2=0.597];HO-1保护组AQP-1与细胞凋亡率无显著相关性(r=0.210,P=0.193),但存在回归关系[y=e^(3.130-59.654/x),R^2=0.225]。结论HO-1可上调H2O2氧化损伤AECⅡ细胞的AQP-1表达水平并降低细胞�

关键词:大鼠肺泡上皮细胞凋亡

单位:遵义医学院 贵州563000 遵义医学院附属医院重症医学科 贵州563003 贵州省人民医院重症医学科

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