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亚甲蓝治疗对脓毒症大鼠肺脏诱导型一氧化氮合酶变化的影响

戴成 于湘友 中华危重病急救医学 2016年第02期

摘要:目的观察亚甲蓝对脓毒症大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA转录及蛋白表达影响的时间窗及作用机制。方法将126只雌性Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、脓毒症组和亚甲蓝组,每组再按术后时间分为0、6、12、18、24、30、36h7个亚组,每个亚组6只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症动物模型,Sham组仅开腹和分离盲肠系膜但不结扎和穿孔;亚甲蓝组于CLP术后各时间点分别给予15mg/kg亚甲蓝,其余大鼠给予等量生理盐水。于给药后6h处死各组大鼠,收集肺脏组织标本,用实时荧光定量反转录一聚合酶链反应(RT—qPCR)检测肺组织iNOSmRNA表达,用蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)检测肺组织iNOS蛋白表达,苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理学改变。结果与Sham组比较,脓毒症组术后6、12、18、24h肺组织iNOSmRNA表达明显升高(2-△△Gt:6h为2.42±0.66比1.00±0.38,P=0.002;12h为2.54±0.76比1.00±0.27,P=O.000;18h为5.46±2.26比1.00±0.38,P=O.000;24h为3.03±0.62比1.00±0.33,P=0.001);12、18、24hiNOS蛋白表达也明显升高(灰度值:12h为2.54±0.45比1.00±0.35,P=O.000;18h为2.65±0.64比1.00±0.33,P=O.000;24h为3.03±0.59比1.00±0.24,P=0.000)。与脓毒症组比较,亚甲蓝组6、12、18、24h肺组织iNOSmRNA表达明显降低(2““‘:6h为1.55±0.82比2.42±0.66,P=O.034;12h为1.84±0.42比2.54±0.76,P=0.016;18h为2.66±1.09比5.46±2.26,P=0.003;24h为2.20±0.29比3.03±0.62,P=0.002);12、18、24hiNOS蛋白表达也明显降低(灰度值:12h为1.84±0.18比2.54±0.45,P=0.003;18h为1.87±0.27比2.65±0.64,P=0.008;24h为2.20±0.50比3.03±0.59,P=0.008)。组织病理学观察显示,各时间点脓毒症组和亚甲蓝组大

关键词:脓毒症诱导型一氧化氮合酶亚甲蓝肺损伤

单位:新疆医科大学第一附属医院重症医学科 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011

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