端粒结合蛋白研究是近年来发展比较快的一个新的研究领域.自Chong在1995年发现人端粒重复序列结合因子TRF1后,近几年已发现了包括TRF2、TANK1、TANK2、TIN2、Pinx1、POT1等在内的10余种端粒结合蛋白.这些蛋白与端粒一起形成三维环状结构t-loop,其中端粒结合蛋白、端粒、端粒酶及其它参与细胞功能调控的重要蛋白相互作用,共同完成对DNA损伤修复、...
1病例摘要 患者男,35岁,体重57 kg,因食道平滑肌瘤而入院.术前体检及实验室检查结果均在正常范围,无高血压、心脏病及其他脏器疾病史.在全麻复合硬膜外麻醉下行食道平滑肌瘤摘除术.术前口服安定7.5 mg.入手术室后开放上肢静脉并行T4～5硬膜外穿刺,以咪唑安定3 mg、芬太尼0.2 mg、2%硫喷妥钠200 mg、维库溴胺8 mg麻醉诱导,顺利插入F37号左双腔支...
目的:分离和鉴定端粒结合因子(TRF1)免疫共沉淀蛋白复合物并克隆其基因.方法:以TRF1抗体应用免疫共沉淀方法,从细胞蛋白抽提物中分离TRF1蛋白复合物,并作蛋白质肽指纹谱鉴定;应用温度梯度PCR,从人cDNA文库中扩增目的基因,并构建pEGFP-C2真核表达载体;核苷酸测序和Western blot验证目的基因序列和表达载体.结果:从TRF1免疫沉淀复合物中分离出了Ta...
目的:研究Pin1(肽酰脯胺酰顺反式易构酶)在髓系、淋系10种恶性血液病细胞株中的表达情况以及其与不同细胞周期的关系.方法:利用Realtime-PCR检测血液病细胞株的Pin1表达,同时用Thymidine和Nocodazole将细胞阻断在不同的细胞周期,用Realtime-PCR及Western Blot的方法,检测Pin1的mRNA和蛋白的表达水平.结果:Pin1在恶性血液病细胞株中mRNA的表达明...
目的:构建人转化生长因子βⅡ型受体胞外区(sTGFβRⅡ)基因的真核表达载体,转染真核细胞CHO以表达sTGFβRⅡ蛋白,并检测其生物学活性.方法:以TGFβRⅡ的重组质粒为模板,用PCR方法扩增得到人TGFβRⅡ胞外区(1-159位氨基酸)的cDNA,将该cDNA重组到真核表达载体pCDNA3.1/myc-his(-)B(pCDNA)的EcoRⅠ和HindⅢ多克隆位点上,构建成pCDNA-sTGFβRⅡ重组质粒.经...
目的:应用计算机视频跟踪技术,建立一种测定小鼠长时间开场自发活动的新方法.方法:应用连续记录22 h内小鼠在开场的自发活动,并用我们研制的AnalyPower1.1系统分析活动轨迹;以自发活动总路程、各区域活动路程及其占总路程的比例、各区域停留时间及其占总时间比例等指标,评价小鼠自发活动的特点.结果:小鼠在清醒自由状态下,22 h内的活动表现显著...
目的:研究来氟米特活性代谢物A771726对肝星状细胞(HSC)增殖和胶原合成的影响.方法:用链蛋白酶和胶原酶原位肝灌注、Nycodenz密度离心法分离大鼠HSC和Kupffer细胞,制备Kupffer培养上清液(KCCM),并以不同浓度、不同培养时间的CCl4损伤的KCCM作为刺激因素观察了A771726对HSC增殖(3H-TdR掺入法)和胶原合成(3H-Pro掺入法)的影响.ELISA法测定KCCM内TG...
目的:探讨乳糖诱导幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(ureB)、黏附因子(hpaA)和大肠杆菌肠毒素B亚单位(ltB)、A亚单位突变体63(ltKA63)重组基因表达的效果及最佳表达条件.方法:采用BIO-RAD凝胶图象分析系统测定表达的目的重组蛋白产量.采用SDS-PAGE检测不同乳糖浓度、诱导时间和温度对不同生长阶段工程菌重组蛋白表达量的影响,并与异丙基硫代半乳糖苷(iso...
目的：建立视频跟踪-计算机自动分析的小鼠条件性位置偏爱实验系统。方法：位置偏爱系统主要由电脑、摄像头、活动盒、隔音箱以及相应的分析软件组成。用吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱实验评价建立的位置偏爱实验系统，同时研究条件化训练过程中，吗啡对小鼠在伴药盒的运动活性的影响。结果：同生理盐水对照组相比，腹腔注射低(1mg/kg)、中(3mg/...
目的：研究HIV Tat蛋白对单核细胞表达HIV辅助受体CCR5的影响，并观察Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞HIVBa-L病毒的影响。方法：以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的CCR5，单核细胞表达分泌的HIV gag p24蛋白由ELISA方法检测。结果：HIV Tat蛋白能增加单核细胞表达CCR5，此作用能被多克隆Tat蛋白抗体所抑制；同时HIV Tat蛋白能明显增加嗜...
目的:建立并优化用于子宫肌瘤蛋白质组分析的二维电泳技术,提高其分辨率和重复性.方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向,采用垂直十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向,并对关键步骤如样品的溶解、上样量、电泳参数和染色方法进行一系列的优化.结果:获得质量较好的子宫肌瘤和正常肌层的二维电泳图谱.结论:采用蛋白溶解度增强的裂解液分步提...
目的:总结保护肌肉剖胸切口在胸腔内手术中的应用经验.方法:1998-2002年选择常规胸腔内手术的病例386例,采用侧胸横切口,游离胸壁肌瓣,根据术野需要选择相应的肋间进胸,用二把牵开器扩大胸腔视野,完成相关的胸腔内手术操作.结果:用该剖胸方法共完成386例多种胸腔内手术,术野显露良好,术后疼痛轻、康复快.结论:保护肌肉剖胸切口具有损伤小和显露...
心肌细胞的死亡是不可逆的,坏死心肌的修复是科研工作者和临床医生面临的严峻挑战.骨髓间质干细胞移植替代受损心肌用于心肌重建,具有来源充足、细胞培养成活率高、骨髓穿刺操作简单安全、自体无免疫排斥等优点.作者介绍了骨髓间质干细胞的来源以及体、内外向心肌细胞定向诱导分化的实验研究.讨论了骨髓间质干细胞向心肌细胞分化的可能机制,还简...
浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心成立于2000年9月．在浙江省医学重点学科血液学科带头人林茂芳教授的带领下，建立了一支经验丰富、思维活跃的医疗和科研队伍：骨髓移植中心主任黄河教授、副主任蔡真教授，医护人员共36名；其中有博导3名，硕导4名．培养博士研究生24人．硕十研究生30人。
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