天然蛋白毒素根据其来源可分为植物、细菌和真菌蛋白毒素等家族.其中,植物蛋白毒素包括有双链结构的毒素和单链核糖体失活蛋白,一般具有N-糖苷酶的活性,可催化核糖体28S RNA的保守位点脱嘌呤,从而失活核糖体60S亚基.细菌蛋白毒素具有结构的多样性,可以失活延长因子2(EF-2)或激活G蛋白,引起细胞功能障碍.毒素一般通过受体介导的内吞作用进入细胞,...
目的:表达蓖麻毒素A链(RTA)与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白 (GFP-RTA),用于蓖麻毒素A链在细胞内的转运机理研究.方法:采用PCR法从重组质粒pKK233.2-RTA中扩增出蓖麻毒素A链基因,然而将其插入真核表达质粒pEGFPC1,构成GFP-RTA融合基因;GFP-RTA经PCR扩增,与T载体连接,用内切酶从T-GFP-RTA中切下GFP-RT段,插入原核表达质粒pET-28a(+);在BL21(DE3)中...
目的:从丝瓜籽中克隆HIV整合酶抑制剂luffin-a基因,并构建其表达载体.方法:根据报道的cDNA序列,用RT-PCR的方法从未成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a基因,T-A克隆后鉴定核苷酸序列.构建表达载体pET-44a(+)-luffin-a,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达.用透析法对包含体复性;SDS-PAGE鉴定luffin-a表达产物,用MTT法分析其生物学活性.结果:克隆的l...
目的:研究溶酶体在蓖麻毒素A链(RTA)细胞内转运过程中的作用.方法:用DNA重组技术,将溶酶体的靶向信号肽KFERQ连接在RTA的羧基端;将构建好的重组质粒pKK223.3-RTA和pKK223.3-RTA-KFERQ转化感受态大肠杆菌JM109,经IPTG诱导表达RTA和RTA-KFERQ蛋白;重组蛋白质用Blue-Sepharose6B亲和柱纯化,以MTT法分别测定纯化后的RTA与RTA-KFERQ蛋白对体外培养的H...
目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)cagA基因片段的原核表达系统,建立ELISA检测CagA及其抗体,了解表达CagA的Hp菌株(CagA+Hp)感染与所致疾病种类的关系.方法:从快速尿素酶试验阳性的156例患者胃黏膜活检标本中分离Hp.采用PCR检测109株Hp cagA基因,并从临床菌株Y06中扩增2 148 bp的cagA基因片段(cagA1).构建cagA1原核表达系统,用SDS-PA...
目的:观察牙种植体结合上皮形成的组织学过程.方法:HE染色及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色,观察Beagle狗1、3、6、9、12、15、20、30 d共8个时间段的牙种植体结合上皮区.结果:种植术后第12 d在牙种植体周围结合上皮开始形成,PCNA呈强阳性表达;第15 d上皮细胞增生趋于平稳,PCNA表达减弱;第20 d有类似天然牙的结合上皮细胞附着,PCNA维持低水平...
目的:采用PLGA/Ⅰ型胶原复合改良生物支架,构建组织工程化骨组织.方法:采用Ⅰ型胶原和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)复合,制作改良的生物支架,将原代培养的成骨细胞接种于复合支架上,培养1周,扫描电镜观察成骨细胞在支架上的生长及黏附情况;同时,将细胞-支架复合体自体异位植入,并取材观察其成骨情况.结果:经鉴定,原代培养的细胞符合成骨细胞的特...
目的:研究幼兔气管内注射博莱霉素(BLM)后肺动脉高压的发生发展.方法:将1月龄幼兔分为2周对照组和BLM组,4周对照组和BLM组.测定其肺动脉收缩压(PASP)、舒张压(PADP)和平均压(MPAP),观测幼兔肺大体结构和中小肺动脉病理变化、管壁厚度指数(TI)、面积指数(AI),以及肺动脉内皮细胞VEGFmRNA、eNOSmRNA的表达和超微结构.结果:在幼兔气管内注射BLM 2周...
目的:探讨珊瑚状遗传性白内障家系P23T突变的γD晶状体蛋白与病变晶状体结构的关系.方法:记录晶状体摘除术前的晶状体裂隙灯照片;应用SWISS-MODEL程序,建立人γD晶状体蛋白及其P23T突变体的计算机立体结构模型;透射和扫描电镜观测晶状体提取物.结果:蛋白立体结构模型分析发现,P23T的突变降低了蛋白最终分子总势能,使蛋白表面结构发生改变.电镜检查...
目的:检测白种人和汉族人RDH8基因序列中单核苷酸多态性(SNP)位点,探讨变性高效液相色谱分析法(DHPLC)在基因组研究中的效能.方法:建立8个由白种人和汉族人基因组DNA组成的混合样品池,并进行PCR扩增.其产物以DHPLC检测,发现杂合子信号后,对单独DNA样本进行DHPLC检测及直接测序确定其突变类型.以DHPLC结合DNA样本混合技术在150个汉族人和20个欧洲...
目的:检测中国一常染色体显性先天性静止性夜盲(ADCSNB)大家系相关基因的致病性突变位点及此病临床表型特征.方法:从该家系16名患者和14名正常成员的外周静脉血提取基因组DNA.根据已报道的与ADCSNB有关的3个基因的5个位点的杂合错义突变设计引物,利用聚合酶链反应扩增5个位点所在的外显子,扩增产物纯化后用MegaBACE1000全自动毛细管测序仪测序....
目的:评价三维动态增强磁共振血管造影(3D DCE MRA)对判断肝移植术后血管狭窄的临床应用价值.方法:对20例肝移植术后患者行3D DCE MRA检查,血管显示分级评分及血管吻合口相对于受体吻合口侧血管狭窄程度的测定,并将结果与超声及DSA检查结果对照.结果:3D DCE MRA显示,本组20例患者血管与背景组织对比佳,肝动脉、门静脉、肝静脉及下腔静脉显示良好...
目的:建立小鼠腹腔异位心脏移植模型.方法:选用建康C57近交系小鼠和BALB/c近交系小鼠,参考大鼠心脏移植Ono式模型,并加以改良.同系移植组(n=20)供、受体均采用BALB/c小鼠;同种异品系移植组(n=20)供体为C57近交系小鼠,受体为BALB/c近交系小鼠.结果:成功建立了小鼠腹腔异位心脏移植模型,供心热缺血时间为(0.9±0.05)min,冷缺血时间为(34.8±0.7)min,...
目的:探讨腹腔镜肾蒂淋巴管结扎治疗乳糜尿的手术方法和疗效,探索乳糜尿的微创治疗新途径.方法:本组3例5侧乳糜尿患者,均为男性,年龄43～67岁,平均49.7岁;双侧2例,左侧1例;行经腹腔途径腹腔镜下肾蒂淋巴管结扎术.结果:手术均取得成功,无1例改开放手术;单侧手术时间平均72 min,术中平均出血52 ml,术后肠道功能恢复时间20～72 h,平均42.7岁;术后乳...
目的:探讨卵巢成熟畸胎瘤超声误诊的原因,以进一步提高超声诊断符合率.方法:总结29例经手术及病理确诊为卵巢成熟畸胎瘤的超声图像,分析其误诊原因.结果:超声诊断卵巢成熟畸胎瘤的误诊率为7.0%,其误诊的超声图像可分为4类:①单房或多房囊性块,内液清,共14例(48.3%);②单房囊性块,内液稠或伴不规则强回声,2例(6.9%);③壁立结节征9例(31.0%);④回...
目的:探讨纤维支气管镜用于口腔颌面外科困难气管插管的效果及临床价值.方法:58例困难气管插管的患者在表面麻醉辅以适当的镇静镇痛的情况下行纤维支气管镜引导下清醒经鼻气管插管.结果:58例患者均一次顺利完成气管插管.结论:应用纤维支气管镜引导下清醒鼻插管,能安全有效地解决口腔颌面外科中的困难气管插管问题.
哺乳动物胚胎中存在两种类型的DNA 甲基转移酶(DnmT):一种是维持型的DnmT1,用于保持子代细胞与母细胞相同的DNA特异性甲基化模式;另一种是新发型的Dnmt3,主要负责建立胚胎发育分化过程中的组织特异性甲基化模式,在卵母细胞中母本印记基因的建立等方面也起一定作用.DnmT对胚胎的正常发育至关重要,其表达缺失或异常表达均可导致胚胎、胎儿的发育异...
对称性联体畸形十分罕见,而坐骨联体畸形所占比例更少.我院2000年收治一例对称性坐骨联体畸形,并成功进行了联体畸形分离术,现总结如下.
浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室从20世纪70年代开始研究生物毒素.经过几代人的共同努力,目前已在动物、植物、海洋和细菌毒素等研究领域形成了自己的特色,取得了不少成果.
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