摘要:目的:研究gamma干扰素(IFN-γ)对人类免疫缺陷病毒(HIV-1)gp120蛋白免疫小鼠后效果的调节作用。方法:利用分子生物学技术,构建表达中国流行株HIV-1gp120N端片段基因的原核质粒pet44b-gp120,及共表达HIV-1gp120N端片段基因与IFN-γ基因的原核质粒pet44b-gp120/IFN-γ,在E.coli BL21(DE3)细胞中进行低温诱导蛋白表达,然后经纯化后免疫BALB/c小鼠。实验设皮下注射gp120/IFN-γ组、gp120组和PBS三组,以检测HIV-1gp120诱导的T细胞增殖能力,CTL杀伤作用以及Th1型细胞因子(IL-2,IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4,IL-10)的表达情况。结果:通过PAGE和Western blot检测,证实上述两种蛋白在DE3细胞中得到表达。免疫学实验表明,针对HIV-1gp120的特异性T淋巴细胞增殖作用、特异性CTL杀伤作用,以及Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ表达在三组之间均有显著性差异(P〈0.05),gp120/IFN-γ组高于gp120组,gp120组高于PBS组(P〈0.05)。反映体液免疫反应的Th2型细胞因子IL-4和IL-10的表达在三组之间没有显著性差异(P〉0.05)。结论:协同应用IFN-γ基因可明显加强HIV-1gp120基因的细胞免疫反应。
关键词:佐剂 免疫 hiv gp120 融合表达
单位:浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所; 卫生部传染病重点实验室; 浙江杭州310003; 杭州市疾病预防控制中心; 浙江杭州310006
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